中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 青蒿概述 | 第14-21页 |
1.1.1 青蒿的分布以及青蒿素含量的变化 | 第14页 |
1.1.2 青蒿素的介绍 | 第14-15页 |
1.1.3 青蒿素的储存位置—腺毛 | 第15-16页 |
1.1.4 青蒿素合成途径 | 第16-19页 |
1.1.5 农杆菌转化体系的研究 | 第19-20页 |
1.1.6 转基因青蒿的研究进展 | 第20-21页 |
1.2 LTP简介 | 第21-22页 |
1.2.1 LTP的结构 | 第21-22页 |
1.2.2 LTP的功能 | 第22页 |
1.3 本实验的研究的目的、意义以及研究的思路 | 第22-24页 |
1.3.1 本实验研究的目的意义 | 第22页 |
1.3.2 本实验研究的思路 | 第22-24页 |
第二章 青蒿组织培养条件的优化 | 第24-30页 |
2.1 实验材料 | 第24页 |
2.1.1 供试材料 | 第24页 |
2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-25页 |
2.2.1 青蒿无菌苗的获得 | 第24页 |
2.2.2 外植体愈伤组织培养 | 第24页 |
2.2.3 芽苗生根培养 | 第24页 |
2.2.4 数据统计与分析 | 第24-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
2.3.1 6-BA、NAA、AgNO_3组合对芽苗诱导生长的影响 | 第25-27页 |
2.3.2 NAA、糖组合对青蒿芽苗生根的影响 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 青蒿高效农杆菌介导转化体系的建立 | 第30-45页 |
3.1 实验材料 | 第30-31页 |
3.1.1 供试材料 | 第30页 |
3.1.2 实验试剂和仪器 | 第30-31页 |
3.2 实验方法 | 第31-34页 |
3.2.1 青蒿再生植株分化阶段卡那霉素耐受性鉴定 | 第31页 |
3.2.2 青蒿再生植株生根阶段卡那霉素耐受性鉴定 | 第31页 |
3.2.3 青蒿种子对卡那霉素抗性筛选 | 第31-32页 |
3.2.4 农杆菌转化体系的优化 | 第32-33页 |
3.2.5 统计分析 | 第33页 |
3.2.6 转基因植株的核酸检测 | 第33-34页 |
3.2.7 GUS组织化学染色分析 | 第34页 |
3.3 实验结果 | 第34-43页 |
3.3.1 青蒿再生植株分化阶段卡那霉素耐受性鉴定 | 第34-35页 |
3.3.2 青蒿再生植株生根阶段卡那霉素耐受性鉴定 | 第35-36页 |
3.3.3 青蒿种子萌发阶段卡那霉素耐受性鉴定 | 第36页 |
3.3.4. 菌液浓度、侵染时间、共培养时间对侵染效果的影响 | 第36-38页 |
3.3.5 外植体和菌株类型对转化率的影响 | 第38-41页 |
3.3.6 Southern印记分析和GUS染色 | 第41-42页 |
3.3.7 转基因植株T_1代植株遗传分析 | 第42-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
第四章 NtLTP1基因在青蒿中的转化和表达研究 | 第45-60页 |
4.1 实验材料 | 第45-46页 |
4.1.1 供试材料 | 第45页 |
4.1.2 实验试剂 | 第45-46页 |
4.1.3 实验仪器 | 第46页 |
4.2. 实验方法 | 第46-51页 |
4.2.1. 农杆菌EHA105感受态的制备 | 第46页 |
4.2.2. pCAM 2301 LTP1质粒的转化 | 第46页 |
4.2.3 质粒提取DNA方法 | 第46-47页 |
4.2.4 农杆菌工程菌的检测方法 | 第47-48页 |
4.2.5 农杆菌转化方法 | 第48页 |
4.2.6 CTAB法提取植物基因组DNA | 第48页 |
4.2.7 植物基因组PCR检验方法 | 第48-49页 |
4.2.8 植物RNA的提取 | 第49页 |
4.2.9 RNA反转录成cDNA | 第49-50页 |
4.2.10 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
4.2.11 超声提取青蒿素以及高效液相检验青蒿中青蒿素的含量 | 第51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-58页 |
4.3.1 工程菌的获得 | 第51-54页 |
4.3.2 转基因青蒿植株获得 | 第54页 |
4.3.3 植物DNA的PCR反应 | 第54-55页 |
4.3.4 实时荧光定量PCR结果 | 第55-56页 |
4.3.5 青蒿素标准曲线的建立 | 第56页 |
4.3.6 转基因青蒿中青蒿素的测定 | 第56-58页 |
4.4 讨论 | 第58-60页 |
总结与展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-74页 |
附录 | 第74-77页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简况及联系方式 | 第79-81页 |