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青蒿高效转化体系建立及NtLTP1对青蒿素含量的影响

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
第一章 文献综述第14-24页
    1.1 青蒿概述第14-21页
        1.1.1 青蒿的分布以及青蒿素含量的变化第14页
        1.1.2 青蒿素的介绍第14-15页
        1.1.3 青蒿素的储存位置—腺毛第15-16页
        1.1.4 青蒿素合成途径第16-19页
        1.1.5 农杆菌转化体系的研究第19-20页
        1.1.6 转基因青蒿的研究进展第20-21页
    1.2 LTP简介第21-22页
        1.2.1 LTP的结构第21-22页
        1.2.2 LTP的功能第22页
    1.3 本实验的研究的目的、意义以及研究的思路第22-24页
        1.3.1 本实验研究的目的意义第22页
        1.3.2 本实验研究的思路第22-24页
第二章 青蒿组织培养条件的优化第24-30页
    2.1 实验材料第24页
        2.1.1 供试材料第24页
        2.1.2 实验试剂第24页
    2.2 实验方法第24-25页
        2.2.1 青蒿无菌苗的获得第24页
        2.2.2 外植体愈伤组织培养第24页
        2.2.3 芽苗生根培养第24页
        2.2.4 数据统计与分析第24-25页
    2.3 结果与分析第25-28页
        2.3.1 6-BA、NAA、AgNO_3组合对芽苗诱导生长的影响第25-27页
        2.3.2 NAA、糖组合对青蒿芽苗生根的影响第27-28页
    2.4 讨论第28-30页
第三章 青蒿高效农杆菌介导转化体系的建立第30-45页
    3.1 实验材料第30-31页
        3.1.1 供试材料第30页
        3.1.2 实验试剂和仪器第30-31页
    3.2 实验方法第31-34页
        3.2.1 青蒿再生植株分化阶段卡那霉素耐受性鉴定第31页
        3.2.2 青蒿再生植株生根阶段卡那霉素耐受性鉴定第31页
        3.2.3 青蒿种子对卡那霉素抗性筛选第31-32页
        3.2.4 农杆菌转化体系的优化第32-33页
        3.2.5 统计分析第33页
        3.2.6 转基因植株的核酸检测第33-34页
        3.2.7 GUS组织化学染色分析第34页
    3.3 实验结果第34-43页
        3.3.1 青蒿再生植株分化阶段卡那霉素耐受性鉴定第34-35页
        3.3.2 青蒿再生植株生根阶段卡那霉素耐受性鉴定第35-36页
        3.3.3 青蒿种子萌发阶段卡那霉素耐受性鉴定第36页
        3.3.4. 菌液浓度、侵染时间、共培养时间对侵染效果的影响第36-38页
        3.3.5 外植体和菌株类型对转化率的影响第38-41页
        3.3.6 Southern印记分析和GUS染色第41-42页
        3.3.7 转基因植株T_1代植株遗传分析第42-43页
    3.4 讨论第43-45页
第四章 NtLTP1基因在青蒿中的转化和表达研究第45-60页
    4.1 实验材料第45-46页
        4.1.1 供试材料第45页
        4.1.2 实验试剂第45-46页
        4.1.3 实验仪器第46页
    4.2. 实验方法第46-51页
        4.2.1. 农杆菌EHA105感受态的制备第46页
        4.2.2. pCAM 2301 LTP1质粒的转化第46页
        4.2.3 质粒提取DNA方法第46-47页
        4.2.4 农杆菌工程菌的检测方法第47-48页
        4.2.5 农杆菌转化方法第48页
        4.2.6 CTAB法提取植物基因组DNA第48页
        4.2.7 植物基因组PCR检验方法第48-49页
        4.2.8 植物RNA的提取第49页
        4.2.9 RNA反转录成cDNA第49-50页
        4.2.10 实时荧光定量PCR第50-51页
        4.2.11 超声提取青蒿素以及高效液相检验青蒿中青蒿素的含量第51页
    4.3 结果与分析第51-58页
        4.3.1 工程菌的获得第51-54页
        4.3.2 转基因青蒿植株获得第54页
        4.3.3 植物DNA的PCR反应第54-55页
        4.3.4 实时荧光定量PCR结果第55-56页
        4.3.5 青蒿素标准曲线的建立第56页
        4.3.6 转基因青蒿中青蒿素的测定第56-58页
    4.4 讨论第58-60页
总结与展望第60-62页
参考文献第62-74页
附录第74-77页
攻读学位期间取得的研究成果第77-78页
致谢第78-79页
个人简况及联系方式第79-81页

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