| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-29页 |
| ·种子的发育过程 | 第12-16页 |
| ·胚的发育 | 第12-15页 |
| ·胚乳的发育 | 第15-16页 |
| ·种皮的发育 | 第16页 |
| ·种子发育大小的调控 | 第16-22页 |
| ·调控种子大小的BR途径 | 第17-19页 |
| ·调控种子大小的泛素化途径 | 第19-20页 |
| ·表观遗传调控途径 | 第20-21页 |
| ·其他调控基因 | 第21-22页 |
| ·ABA在植物发育中的作用 | 第22-27页 |
| ·ABA的合成 | 第23-24页 |
| ·ABA的感知和信号转导 | 第24-25页 |
| ·ABA信号响应和调节 | 第25-26页 |
| ·ABA的降解 | 第26页 |
| ·ABA在种子发育过程中的作用 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-47页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第29页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·酶、试剂 | 第29-30页 |
| ·酶及试剂盒 | 第29-30页 |
| ·生化试剂 | 第30页 |
| ·PCR引物合成 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-47页 |
| ·突变体的鉴定 | 第30-31页 |
| ·SDS法提取拟南芥基因组DNA | 第30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·突变体中种子相关基因的RT-PCR | 第31-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·检测所提RNA的质量和浓度 | 第32页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR | 第33页 |
| ·构建转基因表达载体 | 第33-38页 |
| ·设计PCR引物 | 第33页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第33-34页 |
| ·DNA目的片段的回收 | 第34页 |
| ·连接DNA目的片段与克隆载体 | 第34页 |
| ·Inoue法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第34-35页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第35页 |
| ·大肠杆菌的菌落PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·DNA序列的测定 | 第36页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第36页 |
| ·质粒DNA的酶切 | 第36页 |
| ·试剂盒法回收DNA片段 | 第36页 |
| ·目的DNA片段与质粒DNA片段的连接 | 第36-37页 |
| ·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·电转法转化农杆菌 | 第37-38页 |
| ·拟南芥的栽培与转化 | 第38-39页 |
| ·拟南芥的栽培 | 第38页 |
| ·拟南芥的转化 | 第38-39页 |
| ·ABA2基因在种子发育过程中的组织定位 | 第39页 |
| ·GUS染色 | 第39页 |
| ·DIC观察ABA2基因在种子发育过程中的表达 | 第39页 |
| ·酵母单杂交 | 第39-41页 |
| ·pAbAi-Bait的质粒构建及线性化 | 第39-40页 |
| ·Y1H酵母感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·酵母转化 | 第40页 |
| ·pBait-AbAi酵母菌株的AbA抗性表达检测 | 第40-41页 |
| ·制备pBait-AbAi酵母菌感受态及pGADT7-Target gene转化 | 第41页 |
| ·转化pAbAi-Baitmut+ Gene-AD | 第41页 |
| ·染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第41-43页 |
| ·凝胶迁移实验（EMSA） | 第43-47页 |
| ·蛋白表达和纯化 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE | 第44-45页 |
| ·生物素标记的探针复性 | 第45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶转膜 | 第46页 |
| ·核酸的固定检测 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-59页 |
| ·ABA合成缺陷突变体种子体积增大 | 第47页 |
| ·ABA负调控SHB1的表达 | 第47-51页 |
| ·aba2-1 突变体中SHB1表达量显著升高 | 第47-49页 |
| ·SHB1对外施ABA敏感 | 第49-51页 |
| ·种子发育过程中ABA2的表达模式和SHB1基因相似 | 第51-52页 |
| ·ABA2在种子中高水平表达 | 第51页 |
| ·ABA2和SHB1基因在种子中的表达模式相似 | 第51-52页 |
| ·ABA可能通过ABI5调节SHB1的表达 | 第52-54页 |
| ·aba2-1 突变体中ABI5表达量降低 | 第52-53页 |
| ·ABI5可能是调节SHB1表达的ABA响应因子 | 第53-54页 |
| ·ChIP实验表明ABI5结合到SHB1启动子上 | 第54-56页 |
| ·酵母单杂交表明ABI5可以结合到SHB1启动子上 | 第56-57页 |
| ·EMSA实验验证ABI5可以直接结合到SHB1启动子的S3区段 | 第57-59页 |
| ·ABI5蛋白的表达和纯化 | 第57-58页 |
| ·EMSA实验 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
