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干旱诱导小麦F-box蛋白基因TαFBA1表达提高转基因烟草抗旱性的研究

中文摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-24页
   ·泛素-26S蛋白酶体系统(UPS)第14-18页
     ·泛素第15页
     ·泛素活化酶(E1)第15-16页
     ·泛素激活酶(E2)第16页
     ·泛素连接酶(E3)第16-18页
       ·HECT结构域家族第17页
       ·RING/U-box结构域家族第17页
       ·SCF复合体第17-18页
       ·26S蛋白酶体第18页
   ·泛素/26S蛋白酶体的功能第18-21页
     ·泛素/26S蛋白酶体途径参与植物激素信号途径第18-19页
     ·泛素/26S蛋白酶体途径参与花器官的发育第19-20页
     ·泛素/26S蛋白酶体途径参与光形态建成第20页
     ·泛素/26S蛋白酶体途径参与生物和非生物胁迫第20-21页
   ·植物启动子的研究进展第21-22页
     ·组成型启动子第21页
     ·组织特异性启动子第21-22页
     ·诱导型启动子第22页
   ·本研究的目的及意义第22-24页
2 材料与方法第24-38页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·烟草材料培养及处理第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·酶与各种生化试剂第24页
     ·PCR引物第24-25页
   ·实验方法第25-38页
     ·转基因烟草PCR鉴定第25-26页
       ·CTAB法提取烟草基因组DNA第25-26页
       ·转基因烟草的PCR检测第26页
     ·转基因烟草基因表达水平的检测第26-29页
       ·TRIZOL法提取RNA第26-27页
       ·反转录cDNA第一条链的合成第27-28页
       ·荧光定量PCR检测基因的表达水平第28-29页
     ·转基因烟草F-box蛋白的Western杂交第29-31页
       ·植物总蛋白的提取第29页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第29-30页
       ·半干法蛋白转移第30-31页
       ·封闭及杂交第31页
     ·农杆菌介导法转化烟草第31-32页
       ·农杆菌培养第32页
       ·烟草转化、培养及植株再生第32页
     ·GUS化学染色第32-33页
     ·转基因烟草的生理指标测定第33-36页
       ·烟草种子萌发率第33页
       ·光合参数的测定第33页
       ·叶片相对含水量的测定第33-34页
       ·失水速率的测定第34页
       ·电导法测量植物电解质外渗第34页
       ·叶片渗透势的测定第34页
       ·叶绿素含量的测定第34-35页
       ·脯氨酸含量的测定第35页
       ·可溶性糖的测定第35页
       ·DAB和NBT染色第35页
       ·过氧化氢含量的测定第35-36页
       ·超氧阴离子自由基的测定第36页
       ·丙二醛(MDA)的含量测定第36页
       ·抗氧化酶活性的测定第36页
     ·统计分析第36-38页
3 结果与分析第38-52页
   ·诱导表达TaFBA1转基因烟草的筛选及鉴定第38-39页
   ·不同类型转基因植株的表型差异第39页
   ·诱导表达TaFBA1转基因植株的抗旱性分析第39-42页
     ·诱导表达TaFBA1增强了烟草种子萌发对水分胁迫的抗性第39-40页
     ·诱导表达TaFBA1可以提高烟草植株对干旱胁迫的抗性第40-41页
     ·干旱胁迫诱导表达TaFBA1烟草光合参数的检测第41-42页
   ·诱导表达TaFBA1对转基因烟草渗透调节能力的影响第42-44页
     ·诱导表达TaFBA1转基因植株具有较高的水分保持能力第42-43页
     ·诱导表达TaFBA1提高转基因烟草可溶性糖和脯氨酸的积累第43-44页
   ·诱导表达TaFBA1对转基因烟草抗氧化能力的影响第44-49页
     ·干旱胁迫对RD29A::TaFBA1转基因烟草过氧化氢和超氧阴离子自由基含量的影响第44-46页
     ·干旱胁迫对RD29A::TaFBA1转基因烟草MDA和电解质外渗的影响第46-47页
     ·甲基紫精(MV)处理对RD29A::TaFBA1转基因烟草的影响第47页
     ·干旱胁迫对RD29A::TaFBA1转基因烟草抗氧化酶活性的影响第47-48页
     ·干旱胁迫对RD29A::TaFBA1转基因烟草抗氧化酶相关基因表达的影响第48-49页
   ·TaFBA1启动子的表达分析第49-52页
     ·proTaFBA1::GUS表达载体的构建及转化第49-51页
     ·TaFBA1启动子的分析第51-52页
4 讨论第52-56页
   ·干旱诱导表达TaFBA1可以消除正常情况下TaFBA1过表达所引起的表型差异第52-53页
   ·干旱诱导表达TaFBA1可以提高转基因植株的干旱抗性第53页
   ·转基因植株可以通过降低渗透势以维持较高的水分保持能力第53-54页
   ·干旱胁迫下转基因烟草中活性氧(ROS)的积累量低于野生型第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表论文情况第67页

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