| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-23页 |
| ·鱼用疫苗类型 | 第12页 |
| ·鱼用疫苗接种方式 | 第12-13页 |
| ·鱼病害迟缓爱德华氏菌疫苗的研究进展 | 第13-17页 |
| ·灭活疫苗 | 第14页 |
| ·弱毒疫苗 | 第14-15页 |
| ·DNA疫苗 | 第15-16页 |
| ·亚单位疫苗 | 第16页 |
| ·空壳疫苗 | 第16-17页 |
| ·外膜小泡疫苗 | 第17页 |
| ·蓝藻作为口服疫苗载体的可行性 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-23页 |
| 前言 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-69页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌种,藻种 | 第25页 |
| ·质粒载体 | 第25页 |
| ·工具酶 | 第25-26页 |
| ·核酸蛋白分子Marker及Loading buffer | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·鱼 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·试剂盒 | 第29页 |
| ·抗体 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-69页 |
| ·常用试剂溶液的配制 | 第29-33页 |
| ·常用实验方法 | 第33-39页 |
| ·迟缓爱德华氏菌HtD基因组DNA的提取 | 第39页 |
| ·PCR扩增迟缓爱德华氏菌免疫原性蛋白基因etal及gapdh | 第39-41页 |
| ·重叠PCR扩增融合基因(etal-L-gapdh) | 第41-43页 |
| ·融合基因(etal-L-gapdh)与克隆载体的连接及验证 | 第43-44页 |
| ·融合基因(etal-L-gapdh)与表达载体的连接及验证 | 第44-48页 |
| ·表达载体pRL489-etal-L-gapdh转化鱼腥藻7120 | 第48-50页 |
| ·PCR验证转基因鱼腥藻7120 | 第50-52页 |
| ·转基因蓝藻稳定性考察 | 第52-54页 |
| ·转基因藻中融合基因转录表达分析 | 第54-57页 |
| ·大肠杆菌中融合基因蛋白表达分析 | 第57-58页 |
| ·转基因藻中融合基因蛋白表达分析 | 第58-59页 |
| ·用于pET体系的表达载体构建 | 第59-62页 |
| ·融合基因在pET-30a体系中的表达验证 | 第62-64页 |
| ·融合蛋白的分离纯化 | 第64-65页 |
| ·转基因藻中融合蛋白表达量的确定 | 第65-66页 |
| ·转基因藻免疫斑马鱼实验 | 第66-69页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第69-98页 |
| ·迟缓爱德华氏菌HtD基因组DNA | 第69页 |
| ·免疫原性蛋白基因etal及gapdh的PCR扩增 | 第69-70页 |
| ·重叠PCR扩增融合基因 | 第70-71页 |
| ·融合基因(etal-L-gapdh)与克隆载体的连接及验证 | 第71-75页 |
| ·融合基因与表达载体的连接及验证 | 第75-78页 |
| ·表达载体转化鱼腥藻7120 | 第78-79页 |
| ·抗生素筛选转基因鱼腥藻7120 | 第79页 |
| ·PCR验证转基因鱼腥藻7120 | 第79-81页 |
| ·转基因蓝藻稳定性考察 | 第81-82页 |
| ·转基因藻中融合基因转录表达分析 | 第82-84页 |
| ·大肠杆菌中融合基因蛋白表达分析 | 第84-85页 |
| ·转基因藻中融合基因蛋白表达分析 | 第85-88页 |
| ·用于pET体系的表达载体构建 | 第88-90页 |
| ·融合基因在pET-30a体系中的表达验证 | 第90-91页 |
| ·融合蛋白的分离纯化 | 第91-92页 |
| ·Western-blot验证不同宿主中融合蛋白表达 | 第92-93页 |
| ·转基因藻中融合蛋白表达量的确定 | 第93-95页 |
| ·转基因藻免疫斑马鱼实验 | 第95-98页 |
| 第4章 结语 | 第98-101页 |
| 参考文献 | 第101-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 在学期间主要研究成果 | 第105页 |
