| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-15页 |
| ·研究背景 | 第11-14页 |
| ·柠条锦鸡儿 | 第11页 |
| ·海藻糖合成途径 | 第11-12页 |
| ·海藻糖研究进展 | 第12页 |
| ·海藻糖与植物的开花 | 第12页 |
| ·海藻糖与致病菌的毒素合成 | 第12-13页 |
| ·海藻糖与抗性生理 | 第13页 |
| ·海藻糖合成途径中关键酶基因的过量表达导致的生长畸变 | 第13-14页 |
| ·研究意义 | 第14页 |
| ·技术路线 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第15-32页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·研究材料 | 第15页 |
| ·试剂及其配制方法 | 第15-17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17页 |
| ·CkTpp基因的克隆及生物信息学分析 | 第17-24页 |
| ·CkTpp基因的克隆 | 第17-23页 |
| ·CkTpp基因的序列分析 | 第23-24页 |
| ·CkTpp在原核生物Transsetta中的异源表达分析 | 第24-28页 |
| ·原核表达载体pET-32a(+)-CkTpp的构建 | 第24-27页 |
| ·原核表达菌的遗传转化 | 第27页 |
| ·原核表达菌中CkTpp蛋白的诱导 | 第27-28页 |
| ·转基因菌株对非生物胁迫的耐受性检测 | 第28页 |
| ·真核表达载体pBI101-CkTpp的构建 | 第28-32页 |
| ·pBI101-CkTpp表达载体构建策略 | 第28-29页 |
| ·构建pBI101-CkTpp重组载体用引物设计 | 第29页 |
| ·目的片段CkTpp的制备 | 第29-30页 |
| ·载体pBI101和目的片段CkTpp的同源重组及转化和鉴定 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-46页 |
| ·CkTpp基因中间片段的克隆 | 第32页 |
| ·CkTpp基因末端序列的克隆 | 第32-33页 |
| ·CkTpp基因5’末端的克隆 | 第32-33页 |
| ·CkTpp基因3’末端的克隆 | 第33页 |
| ·CkTpp cDNA的全长克隆 | 第33-34页 |
| ·CkTpp基因组DNA的全长克隆 | 第34-35页 |
| ·柠条锦鸡儿基因组DNA的提取 | 第34页 |
| ·CkTpp基因组DNA的全长克隆 | 第34-35页 |
| ·CkTpp基因序列的生物信息学分析 | 第35-38页 |
| ·CkTpp基因的序列分析 | 第35-36页 |
| ·CkTpp亚细胞定位预测 | 第36页 |
| ·CkTpp亲疏水性预测 | 第36页 |
| ·CkTpp二级结构预测 | 第36-37页 |
| ·CkTpp保守结构域分析 | 第37页 |
| ·CkTpp跨膜结构域预测 | 第37页 |
| ·CkTpp系统进化分析 | 第37-38页 |
| ·原核表达载体pET-32a(+)-CkTpp的构建 | 第38-41页 |
| ·CkTpp基因开放阅读框的扩增 | 第38-39页 |
| ·质粒pMD19-T-CkTpp和pET-32a(+)酶切 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pET-32a(+)-CkTpp的鉴定 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌Transsetta中的诱导表达 | 第41页 |
| ·转基因苗株的抗逆性检测 | 第41-43页 |
| ·真核表达载体pBI101-CkTpp的构建 | 第43-46页 |
| ·目的片段CkTpp的扩增 | 第43-44页 |
| ·载体pBI101的线性化 | 第44页 |
| ·重组质粒pBI101-CkTpp鉴定 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论和结论 | 第46-49页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
