| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| ·植物热激蛋白的研究状况 | 第13-24页 |
| ·植物热激蛋白研究历史 | 第13-14页 |
| ·植物热激蛋白的产生 | 第14页 |
| ·植物热激蛋白的类型 | 第14-16页 |
| ·植物热激蛋白的特点 | 第16-17页 |
| ·植物热激蛋白的功能 | 第17-22页 |
| ·植物热激蛋白基因表达调控 | 第22-24页 |
| ·植物HSP70热激蛋白功能及研究进展 | 第24-29页 |
| ·植物HSP70的分类 | 第24页 |
| ·HSP70的结构特点 | 第24-25页 |
| ·HSP70基因的转录和表达调控 | 第25-26页 |
| ·HSP70分子伴侣功能 | 第26-27页 |
| ·植物HSP70的研究现状 | 第27-29页 |
| 第二章 引言 | 第29-31页 |
| ·研究背景 | 第29页 |
| ·目的意义 | 第29-30页 |
| ·技术路线 | 第30-31页 |
| 第三章 2个蜡梅HSP70家族成员基因的表达分析 | 第31-43页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·蜡梅花转录组数据库 | 第31页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-36页 |
| ·2个蜡梅HSP70家族成员EST片段的获得 | 第31页 |
| ·蜡梅不同组织及花期采集 | 第31-32页 |
| ·蜡梅不同温度胁迫处理 | 第32页 |
| ·总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第33页 |
| ·实时荧光定量PCR检测E-CpHSP70-1和E-CpHSP70-2基因表达分析 | 第33-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·蜡梅总RNA质量检测 | 第36页 |
| ·实时荧光定量PCR引物溶解曲线分析 | 第36-37页 |
| ·退火温度的优化 | 第37-38页 |
| ·蜡梅E-CpHSP70-1和E-CpHSP70-2基因表达的实时荧光定量PCR检测 | 第38-42页 |
| ·讨论与小结 | 第42-43页 |
| ·蜡梅E-CpHSP70-1和E-CpHSP70-2基因在不同组织和不同花期的表达分析 | 第42页 |
| ·蜡梅E-CpHSP70-1和E-CpHSP70-2基因在低温和高温胁迫下表达 | 第42-43页 |
| 第四章 蜡梅CpHSP70-1基因的克隆及生物信息学分析 | 第43-61页 |
| ·试验材料及仪器设备 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·菌株和载体 | 第43页 |
| ·主要购买的化学试剂及试剂盒 | 第43页 |
| ·自配的主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-48页 |
| ·总RNA的提取及cDNA第一链的获得 | 第44页 |
| ·蜡梅cDNA 5’及3’RACE模板合成 | 第44-45页 |
| ·利用3'RACE克隆CpHSP70-1基因3’端cDNA序列 | 第45-47页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因的克隆 | 第47-48页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因的生物信息学分析 | 第48页 |
| ·结果分析 | 第48-58页 |
| ·蜡梅总RNA提取 | 第48-49页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因的克隆及蛋白及序列分析 | 第49-52页 |
| ·CpHSP70-1基因编码蛋白同源性分析 | 第52-54页 |
| ·CpHSP70-1基因编码蛋白的结构分析 | 第54-58页 |
| ·讨论与小结 | 第58-61页 |
| 第五章 蜡梅CpHSP70-1基因亚细胞定位 | 第61-67页 |
| ·试验材料 | 第61页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·载体及菌株 | 第61页 |
| ·试剂盒及主要试剂 | 第61页 |
| ·自配的主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·试验方法 | 第61-65页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因亚细胞表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位的瞬时表达 | 第63-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-66页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因亚细胞表达载体的构建 | 第65页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位的瞬时表达 | 第65-66页 |
| ·讨论与小结 | 第66-67页 |
| 第六章 蜡梅CpHSP70-1基因植物表达载体的构建及转基因研究 | 第67-93页 |
| ·试验材料 | 第67-68页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·载体及菌株 | 第67页 |
| ·试剂盒及主要试剂 | 第67页 |
| ·自配的主要试剂 | 第67-68页 |
| ·主要仪器设备 | 第68页 |
| ·试验方法 | 第68-77页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因植物超表达载体的构建 | 第68-69页 |
| ·农杆菌GV3101电转化感受态的制备 | 第69页 |
| ·电击法转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第69-70页 |
| ·农杆菌转化子的PCR鉴定及反转化大肠杆菌鉴定 | 第70页 |
| ·烟草和拟南芥遗传转化 | 第70-73页 |
| ·转基因植株高温胁迫处理 | 第73-74页 |
| ·转基因植株在高温胁迫条件下生理指标的测定 | 第74-77页 |
| ·高温胁迫后转基因拟南芥中CpHSP70-1基因的相对表达量 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-90页 |
| ·蜡梅CpHSP70-1基因植物表达载体的构建 | 第77-78页 |
| ·转基因植株的筛选鉴定 | 第78-82页 |
| ·转基因烟草耐热性分析 | 第82-85页 |
| ·转基因拟南芥耐热性分析 | 第85-90页 |
| ·高温胁迫下甸/化尸70-7基因在转基因拟南芥叶片中的表达特征 | 第90页 |
| ·讨论与小结 | 第90-93页 |
| 第七章 总结 | 第93-95页 |
| ·结论 | 第93-94页 |
| ·创新点 | 第94页 |
| ·下一步研究 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-109页 |
| 缩略词表 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 在校期间发表文章和参研项目 | 第113页 |
