摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
第1章 文献综述 | 第15-37页 |
·甘蓝结球机制 | 第15-17页 |
·甘蓝的起源 | 第15页 |
·叶菜类蔬菜的结球现象 | 第15-16页 |
·叶球形成发育机理 | 第16-17页 |
·叶片卷曲的分子机制研究进展 | 第17-21页 |
·卷曲突变体 | 第18页 |
·叶片卷曲发生的机制 | 第18-21页 |
·植物同源异型盒基因 | 第21-26页 |
·同源异型盒基因的结构 | 第21-22页 |
·同源异型盒基因的功能 | 第22页 |
·同源异型盒基因产物的种类 | 第22-23页 |
·植物HD-Zip转录因子功能的研究进展 | 第23-26页 |
·植物转录组学研究进展 | 第26-31页 |
·概论 | 第26-27页 |
·测序技术的发展 | 第27页 |
·转录组学的研究方法 | 第27-31页 |
·植物外源基因整合技术及遗传转化研究 | 第31-37页 |
·植物外源基因的转化 | 第31-33页 |
·外源基因在转基因植株中的表达 | 第33-35页 |
·外源基因在转基因植株中的遗传 | 第35-37页 |
第2章 引言 | 第37-39页 |
·研究的目的与意义 | 第37页 |
·研究内容 | 第37-38页 |
·技术路线 | 第38-39页 |
第3章 甘蓝莲座期叶片和结球期球叶的形态与组织结构比较 | 第39-45页 |
·实验材料 | 第39页 |
·植物材料 | 第39页 |
·试剂与溶液 | 第39页 |
·仪器 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-40页 |
·叶片形态特征观察 | 第39-40页 |
1) 自然状态下叶片形态特征观察 | 第39-40页 |
2) 高温胁迫处理和压叶处理 | 第40页 |
·叶片组织结构石蜡切片观察 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·莲座期叶片与结球期球叶形态 | 第40-42页 |
·莲座叶片与结球期球叶的解剖观察 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第4章 甘蓝同源异型盒基因的克隆与表达分析 | 第45-63页 |
·实验材料 | 第45-46页 |
·植物材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·细菌培养基与主要缓冲液 | 第45-46页 |
·主要仪器与设备 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-50页 |
·总RNA的提取 | 第46页 |
·转录组数据分析及基因筛选 | 第46页 |
·引物设计 | 第46-47页 |
·PCR扩增目的片段 | 第47-48页 |
·PCR产物回收 | 第48页 |
·胶回收产物连接T载体并转化大肠杆菌 | 第48页 |
·阳性克隆的鉴定与测序 | 第48页 |
·甘蓝HB基因生物信息学分析方法 | 第48-49页 |
·HB基因的定量表达分析 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-61页 |
·转录组数据分析与基因的筛选 | 第50-52页 |
·基因的PCR克隆与序列的生物信息学分析 | 第52-57页 |
·HB家族的同源序列比对和系统发育树构建 | 第57页 |
·HB家族基因时空表达的qRT-PCR检测 | 第57-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第5章 BOHB7与BOHB12基因启动子在转化烟草中的表达特性分析 | 第63-73页 |
·材料 | 第63-64页 |
·植物材料 | 第63页 |
·菌株与质粒 | 第63页 |
·试剂 | 第63页 |
·细菌培养基与主要缓冲液 | 第63-64页 |
·主要仪器与设备 | 第64页 |
·方法 | 第64-65页 |
·E.coli DH5α感受态细胞制备 | 第64页 |
·质粒DNA提取 | 第64页 |
·质粒DNA转化农杆菌 | 第64页 |
·BoHB12与BoHB7基因启动子的克隆与植物表达载体构建 | 第64页 |
·BoHB12与BoHB7基因启动子转化烟草及转基因烟草的PCR检测 | 第64-65页 |
·BoHB12与BoHB7基因启动子转基因植株的GUS表达分析 | 第65页 |
·结果与分析 | 第65-71页 |
·BoHB12与BoHB7基因启动子植物表达载体植物表达载体的构建 | 第65-67页 |
·转基因烟草植株的获得 | 第67-69页 |
·BoHB12与BoHB7基因启动子转化转基因烟草GUS表达分析 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第6章 BOHB12与BOHB7基因的甘蓝遗传转化研究 | 第73-97页 |
·材料 | 第73-74页 |
·植物材料 | 第73页 |
·菌株与质粒 | 第73页 |
·试剂 | 第73-74页 |
·细菌培养基与主要缓冲液 | 第74页 |
·主要仪器与设备 | 第74页 |
·方法 | 第74-78页 |
·E.coli DH5α感受态细胞制备 | 第74页 |
·质粒DNA提取 | 第74页 |
·质粒酶切 | 第74页 |
·与pBI525载体连接 | 第74-75页 |
·连接产物转化大肠杆菌及重组质粒的鉴定 | 第75页 |
·重组质粒中目的片段连接方向的鉴定 | 第75-76页 |
·酶切片段与pCAMBIA1300载体连接 | 第76页 |
·连接产物转化大肠杆菌、重组质粒的鉴定及质粒DNA提取 | 第76-77页 |
·质粒DNA转化农杆菌 | 第77页 |
·农杆菌介导法转化甘蓝 | 第77页 |
·抗性甘蓝植株总DNA的提取 | 第77页 |
·甘蓝抗性植株的PCR鉴定 | 第77页 |
·转基因甘蓝植株表型观察 | 第77页 |
·BoHB12过表达和抑制表达转基因植株中BoHB12及几个可能相关基因的定量表达分析 | 第77-78页 |
·结果与分析 | 第78-93页 |
·BoHB12与BoHB7基因正反义中间载体的构建 | 第78-80页 |
·BoHB12与BoHB7基因正反义植物表达载体的构建 | 第80-83页 |
·转基因甘蓝植株的获得 | 第83-85页 |
1) 农杆菌介导转化法获得除草剂抗性植株 | 第83-84页 |
2) 除草剂抗性甘蓝的PCR鉴定 | 第84-85页 |
·转基因甘蓝植株叶片的表型观察 | 第85-89页 |
·BoHB12过表达和抑制表达转基因植株中BoHB12及其他可能相关基因的表达分析 | 第89-93页 |
·讨论 | 第93-97页 |
第7章 结论 | 第97-99页 |
·甘蓝莲座期叶片和结球期球叶的形态与组织结构比较 | 第97页 |
·同源异型盒基因的克隆与分析 | 第97页 |
·BoHB12与BoHB7基因的启动子在转基因烟草中的表达特性分析 | 第97页 |
·BoHB12与BoHB7基因的甘蓝遗传转化研究 | 第97-98页 |
·创新点 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-113页 |
附录 | 第113-121页 |
附录1 缩写词 | 第113-114页 |
附录2 BoHAT2、BoHB27、BoPHB、BoPHV,BoREV基因的cDNA序列和推测的氨基酸序列 | 第114-121页 |
致谢 | 第121-123页 |
在学期间发表文章、参加谏题情况 | 第123页 |