| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 绪论 | 第14-21页 |
| 1. 尘螨对过敏性哮喘的影响 | 第14-15页 |
| 2. 重组过敏原的优势及研究现状 | 第15-17页 |
| 3. 过敏性哮喘动物模型 | 第17-18页 |
| 4. 过敏反应机理研究 | 第18-19页 |
| 5. 本课题的研究意义 | 第19-21页 |
| 第1章 粉尘螨profilin重组蛋白克隆表达纯化 | 第21-36页 |
| ·实验材料和方法 | 第21-30页 |
| ·粉尘螨、过敏性患者血清、菌种及质粒 | 第21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| ·主要实验试剂及耗材 | 第22页 |
| ·主要溶液配制 | 第22-25页 |
| ·粉尘螨profilin基因克隆及蛋白表达纯化 | 第25-29页 |
| ·免疫学鉴定 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-35页 |
| ·RT-PCR扩增粉尘螨profilin片段 | 第30-31页 |
| ·粉尘螨profilin基因序列比对 | 第31-32页 |
| ·克隆表达载体构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白表达及纯化 | 第33页 |
| ·皮肤点刺 | 第33-34页 |
| ·Western Blot和Elisa检测临床患者血清IgE反应性 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第2章 粉尘螨profilin过敏性哮喘小鼠模型建立 | 第36-45页 |
| ·实验材料及方法 | 第36-39页 |
| ·动物及致敏原蛋白 | 第36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36页 |
| ·主要实验试剂 | 第36页 |
| ·主要试剂配制 | 第36页 |
| ·动物分组及尘螨粗浸液制备 | 第36-37页 |
| ·气道高反应性检测 | 第37页 |
| ·血清中特异性IgE和IgG1 检测 | 第37页 |
| ·肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞计数及细胞因子检测 | 第37-38页 |
| ·脾细胞增殖及细胞因子检测 | 第38页 |
| ·肺组织病理学切片 | 第38-39页 |
| ·统计学处理 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-43页 |
| ·气道高反应性检测 | 第39-40页 |
| ·血清中特异性抗体IgE、IgG1 检测 | 第40页 |
| ·肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞计数及细胞因子检测 | 第40-42页 |
| ·淋巴细胞增殖及细胞因子检测 | 第42-43页 |
| ·肺组织病理学切片 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第3章 粉尘螨profilin与其他物种profilin交叉反应性和致敏机理初步探究 | 第45-53页 |
| ·实验材料及方法 | 第45-47页 |
| ·实验动物及主要试剂 | 第45页 |
| ·主要实验仪器 | 第45页 |
| ·表达纯化重组蛋白 | 第45页 |
| ·粉尘螨与鱼尾葵花粉profilin交叉反应性 | 第45-46页 |
| ·粉尘螨与芒果profilin交叉反应性 | 第46页 |
| ·诱导分化获得小鼠原代树突状细胞（BMDCs） | 第46页 |
| ·过敏原刺激原代树突状细胞（DCs） | 第46页 |
| ·Western Blot检测TIM4 蛋白表达 | 第46-47页 |
| ·实时荧光定量PCR检测DC细胞表面分子TIM4 蛋白表达 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·表达纯化获得三种profilin蛋白 | 第47页 |
| ·粉尘螨profilin与鱼尾葵花粉profilin交叉反应性 | 第47-48页 |
| ·粉尘螨profilin与芒果profilin蛋白之间的交叉反应性 | 第48-49页 |
| ·DCs在粉尘螨profilin刺激下表面分子TIM4 上调 .. 36 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
