| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·日本乙型脑炎的流行病学 | 第11-13页 |
| ·日本乙型脑炎的流行简史 | 第11页 |
| ·日本乙型脑炎的易感群体及主要症状 | 第11-12页 |
| ·日本乙型脑炎的流行周期 | 第12-13页 |
| ·日本乙型脑炎的病理学 | 第13-14页 |
| ·日本乙型脑炎的病原学 | 第14-16页 |
| ·日本乙型脑炎病毒的分类 | 第14-15页 |
| ·日本乙型脑炎病毒理化特征及基因组结构 | 第15页 |
| ·日本乙型脑炎病毒的复制过程 | 第15-16页 |
| ·日本乙型脑炎病毒的蛋白质 | 第16-17页 |
| ·NS2B和NS4B蛋白的研究现状 | 第17-18页 |
| ·慢病毒载体的研究进展 | 第18-21页 |
| ·逆转录病毒的复制 | 第19页 |
| ·慢病毒载体 | 第19-20页 |
| ·慢病毒载体的发展 | 第20-21页 |
| ·串联亲和层析 | 第21-24页 |
| ·串联亲和层析的原理 | 第21-22页 |
| ·串联亲和层析的研究进展 | 第22-24页 |
| 2 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 3 实验材料与实验方法 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·化学试剂 | 第25页 |
| ·实验细胞、菌株、毒株、质粒 | 第25页 |
| ·试剂盒 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-41页 |
| ·BHK细胞和 293T细胞的复苏及传代 | 第26-27页 |
| ·JEV-P3株接毒及RNA的提取 | 第27页 |
| ·反转录获取JEV的c DNA | 第27-28页 |
| ·载体图谱、引物设计及融合片段模式图 | 第28-30页 |
| ·Psin-EF2-NS2B(NS4B)-Pur重组质粒的构建 | 第30-33页 |
| ·重组质粒的真核表达分析 | 第33-36页 |
| ·质粒大量提取 | 第36页 |
| ·慢病毒包装 | 第36-37页 |
| ·慢病毒活性测试 | 第37-38页 |
| ·慢病毒感染 | 第38页 |
| ·目的蛋白在细胞系中的真核表达情况检测 | 第38页 |
| ·细胞系的抗嘌呤霉素特性检测 | 第38页 |
| ·利用细胞系进行串联亲和层析实验 | 第38-41页 |
| 4 实验结果与分析 | 第41-52页 |
| ·重组质粒的构建及双酶切鉴定 | 第41-44页 |
| ·重组质粒在真核细胞中的表达情况 | 第44-45页 |
| ·感染得到的细胞系中目的蛋白的表达情况 | 第45-48页 |
| ·运用细胞系进行串联亲和层析实验得到的结果 | 第48-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 6 讨论 | 第53-57页 |
| ·慢病毒细胞系的成功构建 | 第53页 |
| ·钓取相互作用的宿主蛋白 | 第53-55页 |
| ·本研究的总结与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |