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Bcl11a和Bcl11b基因抑制病毒增殖功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表(Abbreviation words)第11-12页
1 文献综述第12-21页
   ·前言第12-13页
   ·淋巴细胞发育研究进展第13-15页
   ·Bcl11a基因研究进展第15-16页
   ·Bcl11b基因研究进展第16-18页
   ·PCV2 研究进展第18-21页
     ·PCV2 对养殖业的危害第18-19页
     ·PCV2 基因组结构特点第19页
     ·PCV2 造成免疫抑制的研究进展第19-21页
2 研究的目的和意义第21-22页
3 材料和方法第22-40页
   ·试验材料第22-25页
     ·试验动物、细胞和PCV2 病毒等第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
     ·主要试剂第23-25页
     ·分析方法及软件第25页
   ·研究方法第25-40页
     ·Bcl11a基因敲除小鼠免疫性能的研究第25-29页
       ·Bcl11a敲除小鼠攻毒PCV2 后血常规、细胞因子、病毒拷贝数、及PCV2 抗体检测第25-28页
       ·Bcl11a敲除小鼠攻毒PCV2 后脾脏和胸腺HE染色第28-29页
       ·MTT法检测Bcl11a+/-小鼠脾淋巴细胞增殖能力第29页
     ·PK15 中超表达Bcl11a、Bcl11b后对PCV2 增殖的影响第29-36页
       ·PK15 中超表达Bcl11a、Bcl11b后对PCV2 mRNA、DNA和蛋白含量的影响第29-31页
       ·激光共聚焦检测Bcl11a、Bcl11b和PCV2 的共定位情况第31-32页
       ·western blot分析Bcl11a、Bcl11b对NF-κB/p65、Hsp27、Hsp70蛋白的影响第32-34页
       ·RT-PCR检测Bcl11a、Bcl11b对周期(P21、P27、P53)、凋亡(bcl2)和抗病毒蛋白(MX1、IRF3)的影响第34-35页
       ·比色法分析Bcl11a、Bcl11b对Caspase3 活性的影响第35-36页
     ·PCV2 对淋巴细胞发育的抑制作用研究第36-40页
       ·昆明小鼠攻毒PCV2 后检测血常规及病毒感染情况第36-38页
       ·间接免疫荧光法分析骨髓、胸腺和脾脏中CD3 阳性T淋巴细胞、    CD19 阳性B淋巴细胞比例第38页
       ·MTT法分析PCV2 对体外培养脾淋巴细胞增殖能力的影响 27 3.2.3.4 qPCR法分析PCV2 对淋巴细胞发育相关基因的影响第38页
       ·q PCR 法分析 PCV2 对淋巴细胞发育相关基因的影响第38-40页
4 结果与分析第40-59页
   ·在个体水平(bcl11a敲除小鼠),分析基因Bcl11a对小鼠免疫功能的影响29第40-48页
     ·基因Bcl11a敲除小鼠的检测和确认第40-41页
     ·基因Bcl11a敲除小鼠的血常规和细胞因子检测第41-44页
     ·基因Bcl11a敲除小鼠免疫力的降低第44-46页
     ·基因Bcl11a敲除小鼠淋巴细胞存活能力分析第46-47页
     ·基因Bcl11a抑制PCV2 增殖的初步分析第47-48页
   ·在细胞水平(PK15 细胞)研究Bcl11a、Bcl11b抑制PCV2 增殖功能及其机理第48-53页
     ·Bcl11a、Bcl11b抑制PCV2 增殖功能的分析第48-50页
     ·Bcl11a、Bcl11b和PCV2 的共定位检测第50-51页
     ·超表达Bcl11a、Bcl11b后PK15 中相关基因蛋白表达量变化第51-53页
   ·PCV2 对淋巴细胞增殖和存活的影响及其机理的初步探讨第53-59页
     ·感染小鼠免疫器官中PCV2 病毒分布第53-54页
     ·感染小鼠外周血中淋巴细胞数量变化第54-55页
     ·PCV2 对体外培养脾淋巴细胞增殖能力的影响第55-56页
     ·感染小鼠骨髓、胸腺和脾脏中淋巴细胞数量和比例变化第56-57页
     ·感染小鼠骨髓、胸腺和脾脏中淋巴细胞发育相关基因表达量变化第57-59页
5.讨论第59-64页
   ·Bcl11a基因敲除小鼠免疫力的降低第59-60页
   ·Bcl11a和Bcl11b对PCV2 增殖的抑制作用第60-62页
   ·PCV2 对淋巴细胞发育的抑制作用第62-64页
6.总结第64-66页
   ·本研究小结第64-65页
   ·本研究的创新点第65页
   ·本研究的不足之处和下一步研究计划第65-66页
参考文献第66-74页
附录第74-76页
致谢第76-77页

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