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CUEDC2在紫外照射诱导G1/S期阻滞中的功能及机制研究

缩略词表第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
前言第10-13页
材料与方法第13-23页
 1 材料与来源第13-14页
   ·菌株、质粒和细胞系第13页
   ·主要试剂第13页
   ·主要仪器设备第13页
   ·抗体第13-14页
   ·细胞培养和转染第14页
 2 实验方法第14-23页
   ·流式细胞分析细胞周期的处理方法第14-15页
   ·细胞周期同步化方法第15页
   ·免疫印迹杂交实验(Western Blot)第15-16页
   ·His 标签蛋白的诱导与纯化方法第16页
   ·BrdU 掺入及染色方法第16-17页
   ·Cyclin E/CDK2 体外激酶实验方法第17-18页
   ·体外泛素化实验方法第18-19页
   ·质谱样品制备及银染方法第19-21页
   ·紫外线照射处理细胞方法第21页
   ·细胞中 Flag 标签蛋白染色方法第21页
   ·皮肤癌免疫组化实验流程第21-23页
实验结果第23-39页
 第一部分 紫外线诱导 CUEDC2 蛋白降解促进 G1 期阻滞第23-31页
  1. CUEDC2 蛋白在紫外照射诱导的 G1 期阻滞中发生降解第23-26页
   ·紫外照射引起 CUEDC2 蛋白量下调第23页
   ·紫外照射特异性引起 CUEDC2 蛋白发生降解第23-24页
   ·过表达 CUEDC2 蛋白能够逆转紫外诱导的 G1 期阻滞第24-26页
  2. 紫外照射时 CUEDC2 能够调控 Cyclin A 的蛋白量和 CDK2 的活性第26-28页
   ·过表达 CUEDC2 能够逆转紫外照射导致的 CDK2 灭活第26页
   ·紫外照射能够明显下调 Cyclin A 的蛋白量第26-27页
   ·紫外照射时 CUEDC2 能够部分恢复 Cyclin A 的蛋白量第27-28页
  3. 过表达 Cyclin A 蛋白可以逆转紫外诱导的 G1 期阻滞第28-29页
  4. CUEDC2 结合 Cdh1 并调控 APC/C~(Cdh1)的活性第29-31页
 第二部分 E3 连接酶 TRIM21 介导了 UV 诱导的 CUEDC2 蛋白降解第31-39页
  1. UV 诱导 CUEDC2 蛋白发生泛素化降解第31-32页
  2. UV 诱导 CUEDC2 蛋白降解不依赖于经典的 DNA 损伤信号通路第32-33页
  3. 质谱筛选结果发现 CUEDC2 能够结合 E3 连接酶 TRIM21第33-35页
  4. TRIM21 介导 CUEDC2 蛋白发生泛素化降解第35-36页
  5. CUEDC2 蛋白在皮肤癌组织中高表达第36-39页
讨论第39-43页
结论第43-45页
参考文献第45-49页
文献综述第49-56页
 参考文献第53-56页
发表文章第56-58页
个人简历第58-59页
致谢第59-60页

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