| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-20页 |
| 第一章 植物转基因技术研究进展 | 第9-12页 |
| 1．1 化学物诱导的DNA直接转化 | 第9页 |
| 1．2 物理法诱导DNA直接转化 | 第9-10页 |
| 1．3 生物法介导的植物遗传转化 | 第10-12页 |
| 第二章 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第12-15页 |
| 2．1 农杆菌介导法的机理 | 第12页 |
| 2．2 农杆菌介导的水稻遗传转化研究进展 | 第12-13页 |
| 2．3 影响农杆菌介导的水稻遗传转化效率的因素 | 第13-14页 |
| 2．3．1 受体的选择 | 第13页 |
| 2．3．2 培养基的组成 | 第13页 |
| 2．3．3 细菌菌株和载体 | 第13-14页 |
| 2．3．4 水稻品种的基因型 | 第14页 |
| 2．3．5 选择标记基因 | 第14页 |
| 2．4 应用农杆菌介导法构建水稻插入标签突变体库是经济有效途径 | 第14-15页 |
| 第三章 农杆菌介导的水稻插入标签突变体库构建策略 | 第15-17页 |
| 3．1 T-DNA标签法 | 第15页 |
| 3．2 转座子标签法 | 第15页 |
| 3．3 逆转座子标签法 | 第15-16页 |
| 3．4 T-DNA激发标签法 | 第16-17页 |
| 第四章 作物数量性状基因研究进展 | 第17-18页 |
| 第五章 本研究的目的意义和内容 | 第18-20页 |
| 第二部分 研究报告 | 第20-47页 |
| 第一章 适合于水稻的激发标签载体的改建 | 第20-29页 |
| 1．1 材料 | 第20页 |
| 1．2 构建策略 | 第20-21页 |
| 1．3 构建步骤 | 第21-24页 |
| 1．3．1 质粒pSKI015和pCAMBIA1305．2 DNA的少量快速提取 | 第21页 |
| 1．3．2 质粒pSKI015和pCAMBIA1305．2的酶切 | 第21-22页 |
| 1．3．3 酶切片段的连接反应 | 第22页 |
| 1．3．4 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第22-23页 |
| 1．3．4．1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 1．3．4．2 连接产物的转化 | 第22-23页 |
| 1．3．5 连接产物的鉴定 | 第23页 |
| 1．3．6 质粒pEn1305的酶切鉴定 | 第23-24页 |
| 1．4 质粒pEn1305转化农杆菌EHA105感受态细胞 | 第24页 |
| 1．4．1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 1．4．2 质粒pEn1305转化农杆菌及农杆菌质粒鉴定 | 第24页 |
| 1．5 增强子4×35S在农杆菌EHA105和大肠杆菌DH5a中的稳定性检测 | 第24-25页 |
| 1．6 结果与分析 | 第25-27页 |
| 1．6．1 DNA连接产物的鉴定结果 | 第25页 |
| 1．6．2 质粒pEn1305的鉴定结果 | 第25-26页 |
| 1．6．3 农杆菌质粒的检测结果 | 第26-27页 |
| 1．6．4 增强子4×35S的稳定性检测结果 | 第27页 |
| 1．7 讨论 | 第27-29页 |
| 1．7．1 构建步骤的简单化 | 第27-28页 |
| 1．7．2 关于质粒DNA的转化 | 第28页 |
| 1．7．3 增强子4×35S的稳定性 | 第28-29页 |
| 第二章 农杆菌介导的水稻遗传转化系统的建立 | 第29-42页 |
| 2．1 材料 | 第29页 |
| 2．1．1 供试材料 | 第29页 |
| 2．1．2 菌株及质粒 | 第29页 |
| 2．1．3 供试试剂 | 第29页 |
| 2．2 水稻幼胚盾片愈伤的诱导 | 第29-30页 |
| 2．3 各种供试药剂对水稻愈伤的影响 | 第30页 |
| 2．3．1 潮霉素、PPT、卡那霉素对水稻愈伤组织生长的影响 | 第30页 |
| 2．3．2 头孢霉素和羧苄青霉素对水稻愈伤生长和分化的影响 | 第30页 |
| 2．4 水稻遗传转化 | 第30-32页 |
| 2．4．1 水稻受体的预处理 | 第30页 |
| 2．4．2 根癌农杆菌的培养 | 第30页 |
| 2．4．3 水稻受体材料与根癌农杆菌的共培养 | 第30-31页 |
| 2．4．4 抗性愈伤的筛选及植株再生 | 第31页 |
| 2．4．5 生根和移栽 | 第31页 |
| 2．4．6 培养基 | 第31-32页 |
| 2．5 转基因植株的检测 | 第32-34页 |
| 2．5．1 转基因植株的基因表达检测 | 第32页 |
| 2．5．1．1 对除草剂Basta涂布的抗性检测 | 第32页 |
| 2．5．1．2 用水稻叶片离体培养的方法检测对潮霉素和Basta的抗性 | 第32页 |
| 2．5．2 转基因植株的分子检测 | 第32-34页 |
| 2．5．2．1 水稻叶片DNA的大量提取 | 第32-33页 |
| 2．5．2．2 BAR基因PCR检测 | 第33页 |
| 2．5．2．3 转基因植株的总DNA Southern杂交分析 | 第33-34页 |
| 2．6 结果与分析 | 第34-38页 |
| 2．6．1 各种供试药剂对水稻愈伤的影响 | 第34-35页 |
| 2．6．1．1 潮霉素、PPT、卡那霉素对水稻愈伤组织生长的影响 | 第34页 |
| 2．6．1．2 头孢霉素和羧苄青霉素对水稻愈伤生长和分化的影响 | 第34-35页 |
| 2．6．2 愈伤组织的转化 | 第35页 |
| 2．6．3 转基因植株对除草剂Basta和潮霉素的抗性 | 第35-36页 |
| 2．6．4 转基因植株的PCR检测 | 第36页 |
| 2．6．5 转基因植株的Southern杂交 | 第36-38页 |
| 2．7 讨论 | 第38-42页 |
| 2．7．1 水稻遗传转化中抗性筛选标记 | 第38页 |
| 2．7．2 农杆菌抑制剂的国产化 | 第38页 |
| 2．7．3 关于遗传转化 | 第38-39页 |
| 2．7．4 转基因植株的生物检测 | 第39-42页 |
| 第三章 水稻激发突变体库的构建 | 第42-46页 |
| 3．1 材料 | 第42页 |
| 3．2 转化方法 | 第42页 |
| 3．3 转基因植株的检测 | 第42-43页 |
| 3．3．1 微量抽提水稻叶片总DNA | 第42页 |
| 3．3．2 转基因植株的PCR特异扩增 | 第42-43页 |
| 3．3．3 转基因植株的潮霉素抗性检测 | 第43页 |
| 3．4 农杆菌鉴定 | 第43页 |
| 3．5 结果与分析 | 第43-44页 |
| 3．5．1 水稻遗传转化结果 | 第43页 |
| 3．5．2 转基因植株的PCR检测结果 | 第43-44页 |
| 3．5．3 转基因植株的潮霉素抗性检测结果 | 第44页 |
| 3．6 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 研究小结和进一步研究的打算 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录A 本文所用缩略词一中英文对照 | 第52-53页 |
| 附录B 主要培养基母液及贮存液配制 | 第53-56页 |
| 附录C 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第56-57页 |
| 谢辞 | 第57页 |
