摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
目录 | 第11-13页 |
绪论 | 第13-21页 |
水通道蛋白 4(AQP4) | 第13-14页 |
星形胶质细胞和 AQP4 | 第14-15页 |
脑水肿 | 第15页 |
小胶质细胞 | 第15-17页 |
骨髓间充质干细胞(MSCs) | 第17-19页 |
丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK) | 第19-21页 |
第一章 骨髓间充质干细胞分离,鉴定及示踪 | 第21-30页 |
·引言 | 第21-22页 |
·材料与方法 | 第22-26页 |
·研究对象 | 第22页 |
·主要材料和试剂 | 第22-24页 |
·骨髓间充质干细胞分离与培养 | 第24页 |
·骨髓间充质干细胞鉴定 | 第24-25页 |
·Dil 示踪移植细胞 | 第25-26页 |
·数据分析 | 第26页 |
·实验结果 | 第26-28页 |
·骨髓间充质干细胞的培养与形态 | 第26-27页 |
·骨髓间充质干细胞鉴定 | 第27-28页 |
·骨髓间充质干细胞示踪 | 第28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第二章 骨髓间充质干细胞对脑缺血后脑水肿及血脑屏障的影响 | 第30-56页 |
·引言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-45页 |
·研究对象 | 第31页 |
·主要仪器和试剂 | 第31-34页 |
·实验分组及设计 | 第34页 |
·小鼠神经缺陷评估 | 第34-35页 |
·脑水含量测定 | 第35页 |
·脑组织伊文斯蓝(EB)渗出测定 | 第35-36页 |
·免疫球蛋白 G 染色 | 第36页 |
·免疫荧光 | 第36-37页 |
·Real Time PCR | 第37-40页 |
·定量 PCR 数据分析 | 第40页 |
·Western blot 检测 | 第40-41页 |
·TUNEL 及星型胶质细胞双标 | 第41-42页 |
·星形胶质细胞分离 | 第42-43页 |
·MSC 条件培养基的准备 | 第43页 |
·小胶质细胞条件培养基的准备 | 第43页 |
·星形胶质细胞中 AQP4 干扰 | 第43-44页 |
·AQP4 干扰对炎症条件下星形胶质细胞凋亡影响 | 第44-45页 |
·星形胶质细胞和 bEnd.3 共培养及紧密连接蛋白表达检测 | 第45页 |
·数据分析 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-54页 |
·MSCs 提高神经行为学表现 | 第45-46页 |
·MSCs 减少脑水肿 | 第46-47页 |
·MSCs 保护血脑屏障的完整性 | 第47-48页 |
·MSCs 减少闭合蛋白(occludin)和紧密连接蛋白-1(Zo-1)间隙形成 | 第48-49页 |
·骨髓间充质干细胞降低脑缺血引起的 AQP4 表达上调 | 第49-50页 |
·MSCs 降低脑缺血引起的星形胶质细胞的凋亡 | 第50-51页 |
·AQP4 干扰效率检测 | 第51-52页 |
·AQP4 干扰减少炎症引起的星形胶质细胞的凋亡 | 第52-53页 |
·AQP4 干扰降低炎症引起的紧密连接蛋白 Occludin 表达下降 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第三章 骨髓间充质干细胞(MSCs)对水通道蛋白 4(AQP4)表达的调节作用及其可能机制 | 第56-68页 |
·引言 | 第56页 |
·材料与方法 | 第56-61页 |
·研究对象 | 第56-57页 |
·主要材料和试剂 | 第57-59页 |
·实验分组及设计 | 第59-60页 |
·MSC 条件培养基的准备 | 第60页 |
·小胶质细胞条件培养基的准备 | 第60页 |
·小胶质细胞 RNA 提取 | 第60页 |
·星形胶质细胞分离和处理 | 第60-61页 |
·体内 p38 抑制实验 | 第61页 |
·数据分析 | 第61页 |
·实验结果 | 第61-66页 |
·骨髓间充质干细胞抑制炎症反应 | 第61-62页 |
·小胶质细胞条件培养液对星形胶质细胞水通道蛋白 4 表达影响 | 第62-63页 |
·小胶质细胞条件培养液能激活星形胶质细胞 p38 和 JNK MAPK 信号通路 | 第63-64页 |
·p38,JNK MAPK 信号通路对 AQP4 上调影响 | 第64-65页 |
·体内验证 P38 对 AQP4 表达影响 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
全文总结 | 第68-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
附录 | 第79-82页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |