| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-30页 |
| ·白细胞介素-18(IL-18)的性质与作用 | 第10-17页 |
| ·IL-18 的来源 | 第10页 |
| ·IL-18 的结构 | 第10-11页 |
| ·IL-18 的性质 | 第11-12页 |
| ·IL-18 的生物学作用 | 第12-17页 |
| ·重组白细胞介素-18(rIL-18)的表达 | 第17-21页 |
| ·rIL-18 的原核表达 | 第18页 |
| ·rIL-18 的酵母表达 | 第18-19页 |
| ·rIL-18 的其他表达系统 | 第19-21页 |
| ·重组人白细胞介素-18(rhIL-18)的毕赤酵母表达 | 第21-30页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优点 | 第21-22页 |
| ·宿主菌和表达载体 | 第22-25页 |
| ·外源蛋白在必赤酵母中的表达 | 第25页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优化方式 | 第25-28页 |
| ·毕赤酵母的高密度发酵 | 第28-30页 |
| 2 实验材料和方法 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-35页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要试剂及培养基配制 | 第30-34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-48页 |
| ·rhIL-18 基因序列的设计及合成 | 第35-36页 |
| ·表达质粒 pPIC9K-rhIL-18 的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| ·表达质粒 pPIC9K-rhIL-18 的线性化 | 第38-39页 |
| ·GS115 感受态的制备 | 第39页 |
| ·电转化 | 第39页 |
| ·基因组 PCR 法筛选阳性克隆 | 第39-41页 |
| ·rhIL-18 工程菌的诱导表达、检测及鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组酵母菌在 3L 发酵罐中的最佳表达条件试验 | 第43-45页 |
| ·rhIL-18 分离纯化方法 | 第45-46页 |
| ·MTT 法 | 第46页 |
| ·Hoechst33258 染色 | 第46-47页 |
| ·统计学分析 | 第47-48页 |
| 3 实验结果 | 第48-58页 |
| ·rhIL-18 表达质粒的结构及分子量 | 第48页 |
| ·表达 rhIL-18 的工程菌 | 第48-51页 |
| ·rhIL-18 工程菌的 3L 罐发酵条件 | 第51-54页 |
| ·分离纯化 rhIL-18 的纯度和收率 | 第54-55页 |
| ·rhIL-18 对 5 种肿瘤细胞活性的影响 | 第55-56页 |
| ·rhIL-18 对 5 种肿瘤细胞凋亡的影响 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目及已发表的论文 | 第76-77页 |
