本论文创新点 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第8-10页 |
第一章 研究背景 | 第10-65页 |
第一节 G蛋白信号转导与调控 | 第10-27页 |
第二节 细胞骨架与细胞迁移 | 第27-54页 |
第三节 受体酪氨酸激酶(RTK)信号转导 | 第54-59页 |
第四节 Ric-8蛋白的功能 | 第59-63页 |
第五节 Abl在肌动蛋白骨架调控中的功能 | 第63-65页 |
第二章 Ric-8A在细胞肌动蛋白骨架调控中的作用 | 第65-90页 |
第一节 选题背景与依据 | 第65-68页 |
第二节 实验材料 | 第68-69页 |
一、细胞系与菌株 | 第68页 |
二、细胞因子与细胞培养材料 | 第68页 |
三、小发卡RNA和转染试剂 | 第68页 |
四、蛋白纯化试剂 | 第68页 |
五、质粒 | 第68页 |
六、抗体与染料 | 第68页 |
七、核苷酸交换实验所用到的试剂 | 第68-69页 |
第三节 实验方法 | 第69-73页 |
一、小发卡RNA干扰稳定细胞系的建立 | 第69页 |
二、细胞划痕与愈伤实验 | 第69-70页 |
三、定量的Boyden小室细胞迁移实验 | 第70页 |
四、免疫荧光实验 | 第70页 |
五、蛋白纯化 | 第70-71页 |
六、Ric-8A活性实验 | 第71页 |
七、GST沉降实验 | 第71-72页 |
八、点突变 | 第72页 |
九、统计学分析 | 第72-73页 |
第四节 实验结果 | 第73-87页 |
一、Ric-8A对于PDGF诱导的膜波皱消失具有重要作用 | 第73-75页 |
二、Ric-8A是PDGF诱导的细胞迁移所必需的 | 第75-78页 |
三、PDGFR能够刺激细胞内Ric-8A的活性 | 第78-80页 |
四、Ric-8A对于Gα_(13)的膜定位是必需的 | 第80-82页 |
五、PDGF刺激改变Ric-8A的氧化和磷酸化修饰 | 第82-86页 |
六、过表达Ric-8A能够诱导细胞的凋亡 | 第86-87页 |
第五节 结论与讨论 | 第87-90页 |
第三章 Gα_(13)-AbI的相互作用调节肌动蛋白骨架动态与细胞迁移 | 第90-108页 |
第一节 实验材料 | 第90-93页 |
一、细胞系与菌株 | 第90页 |
二、细胞因子与细胞培养材料 | 第90页 |
三、转染试剂 | 第90页 |
四、蛋白纯化试剂 | 第90页 |
五、质粒与DNA序列 | 第90-91页 |
六、抗体与染料 | 第91页 |
七、核苷酸交换实验所用到的试剂 | 第91页 |
八、Gα_(13)点突变的引物序列 | 第91-93页 |
第二节 实验方法 | 第93-96页 |
一、小发卡RNA干扰稳定细胞系的建立 | 第93页 |
二、细胞划痕与愈伤实验 | 第93-94页 |
三、定量的Boyden小室细胞迁移实验 | 第94页 |
四、免疫荧光实验 | 第94页 |
五、蛋白纯化 | 第94-95页 |
六、GST沉降实验 | 第95页 |
七、点突变 | 第95页 |
八、统计学分析 | 第95-96页 |
第三节 实验结果与分析 | 第96-106页 |
一、Gα_(13)能够与Ab1直接相互作用 | 第96-98页 |
二、Ab1优先结合GDP结合状态的Gα_(13) | 第98页 |
三、Gα_(13)能够抑制Ab1蛋白的自磷酸化 | 第98-100页 |
四、Ab1与Gα_(13)蛋白的开关区域相互作用 | 第100-102页 |
五、Gα_(13)与Ab1的相互作用影响细胞迁移 | 第102-104页 |
六、Gα_(13)与Abl的相互作用影响环状膜波皱的消失 | 第104-105页 |
七、Ab1能够抑制PDGF诱导的环状膜波皱的消失 | 第105-106页 |
第四节 结论与讨论 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-130页 |
缩略词表 | 第130-133页 |
作者简介 | 第133-134页 |
致谢 | 第134页 |