摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 引言 | 第9-19页 |
·α-甘露糖苷酶研究进展 | 第10-13页 |
·Ⅰ类α-甘露糖苷酶的研究概述 | 第10-12页 |
·Ⅱ类α-甘露糖苷酶研究概述 | 第12页 |
·未分类α-甘露糖苷酶研究概述 | 第12-13页 |
·β-氨基己糖苷酶研究进展 | 第13-16页 |
·GH20 β-氨基己糖苷酶研究进展 | 第13-15页 |
·GH3、GH84 β-氨基己糖苷酶研究进展 | 第15-16页 |
·甜瓜在分子生物学中的前沿及应用 | 第16-18页 |
·研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-26页 |
·甜瓜α-甘露糖苷酶基因和β-氨基己糖苷酶家族的全基因组分析 | 第19-20页 |
·甜瓜α-Man和β-Hex基因家族成员的鉴定 | 第19页 |
·筛选α-Man和β-Hex完整结构基因 | 第19页 |
·甜瓜与多种植物α-Man和β-Hex的生物信息学分析 | 第19-20页 |
·引物的设计与合成 | 第20-21页 |
·cDNA克隆引物的设计与合成 | 第20页 |
·实时荧光定量引物的设计与合成 | 第20-21页 |
·CmMAN2和CmHEX1 cDNA片段的克隆 | 第21-24页 |
·反转录反应 | 第21页 |
·CmMAN2和CmHEX1基因cDNA序列的PCR扩增 | 第21页 |
·PCR产物纯化 | 第21-22页 |
·连接反应 | 第22页 |
·重组质粒的转化 | 第22页 |
·重组质粒快速提取法筛选阳性转化子 | 第22-23页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第23页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第23页 |
·序列测序 | 第23-24页 |
·甜瓜α-man和β-hex基因酶活性测定 | 第24-25页 |
·粗酶液的制备 | 第24页 |
·α-man和β-hex基因酶活性测定 | 第24页 |
·标准曲线的绘制 | 第24-25页 |
·甜瓜CmMAN2和CmHEX1基因在不同发育阶段的果实中与在不同组织中的表达特性分析 | 第25-26页 |
第三章 结果与分析 | 第26-43页 |
·甜瓜α-甘露糖苷酶基因家族的基因序列分析 | 第26-30页 |
·甜瓜α-Man家族基因的确定 | 第26-27页 |
·α-Man基因的遗传进化分析 | 第27-28页 |
·α-Man基因家族保守motif分析 | 第28-30页 |
·甜瓜β-氨基己糖苷酶基因家族的基因序列分析 | 第30-33页 |
·甜瓜β-Hex基因的确定 | 第30页 |
·β-Hex基因的遗传进化分析 | 第30-32页 |
·β-Hex蛋白的motif分析 | 第32-33页 |
·CmMAN2和CmHEX1 cDNA片段的克隆 | 第33-39页 |
·cDNA克隆产物分析 | 第33页 |
·重组质粒快速提取法的筛选 | 第33-34页 |
·重组质粒菌落PCR检测 | 第34页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
·3'端CmMAN2 cDNA片段序列分析 | 第35-37页 |
·CmHEXl cDNA片段序列分析 | 第37-39页 |
·果实发育过程中α-man和β-hex基因酶活性的变化 | 第39-41页 |
·标准曲线的绘制 | 第39页 |
·不同阶段普通甜瓜α-man基因酶活性的测定与分析 | 第39-40页 |
·不同阶段时期β-hex基因酶活性的测定与分析 | 第40页 |
·不同组织中α-man和β-hex基因酶活性的测定与分析 | 第40-41页 |
·甜瓜不同发育成熟阶段CmMAN2和CmHEX1基因的表达特性分析 | 第41-43页 |
·不同发育阶段果实中CmMAN2的表达分析 | 第41页 |
·不同器官中CmMAN2的表达分析 | 第41-42页 |
·不同发育阶段果实中CmHEX1的表达分析 | 第42页 |
·不同器官中CmHEXl的表达分析 | 第42-43页 |
第四章 讨论与结论 | 第43-46页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·α-Man及β-Hex的生物信息学 | 第43-44页 |
·α-man和β-hex基因酶活性变化及表达谱分析 | 第44-45页 |
·结论 | 第45-46页 |
附录 | 第46-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |