| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-44页 |
| 1 MicroRNA 概述 | 第14-20页 |
| ·MicroRNA 定义、发现和功能 | 第14-17页 |
| ·MicroRNA 的定义 | 第14页 |
| ·MicroRNA 的发现 | 第14-15页 |
| ·MicroRNA 的发生 | 第15-16页 |
| ·MicroRNA 的作用机理 | 第16-17页 |
| ·MicroRNA 与疾病 | 第17-20页 |
| ·癌症 | 第17-18页 |
| ·MicroRNA 与癌症 | 第18-20页 |
| 2 MicroRNA 检测 | 第20-38页 |
| ·Northern Blot | 第20-21页 |
| ·RT-PCR | 第21-24页 |
| ·Microarray | 第24-26页 |
| ·纳米检测 | 第26-31页 |
| ·基于纳米金标记技术的检测 | 第26-27页 |
| ·基于纳米孔的检测 | 第27页 |
| ·基于量子点的检测 | 第27-28页 |
| ·基于石墨烯的检测 | 第28-31页 |
| ·核酸杂交扩增检测 | 第31-38页 |
| ·引物入侵法 | 第31-32页 |
| ·基于荧光标记技术和单分子检测 | 第32-33页 |
| ·酶信号扩增检测 | 第33-34页 |
| ·恒温指数放大反应 | 第34-35页 |
| ·环介导的等温扩增 | 第35页 |
| ·滚环扩增法 | 第35-38页 |
| 3 MicroRNA 细胞成像 | 第38-41页 |
| 4 课题创新和研究意义 | 第41-44页 |
| 第二章 基于滚环扩增高灵敏度、高特异性检测 MicroRNA | 第44-56页 |
| 1 引言 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-48页 |
| ·材料和仪器 | 第45-46页 |
| ·链接反应 | 第46页 |
| ·扩增反应 | 第46页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第46-47页 |
| ·荧光光谱测量 | 第47页 |
| ·细胞实验和 RNA 提取 | 第47页 |
| ·分子动态模拟 | 第47页 |
| ·结合自由能 | 第47-48页 |
| 3 结果与讨论 | 第48-55页 |
| ·P-ERCA 反应原理 | 第48-50页 |
| ·特异性实验 | 第50-51页 |
| ·Padlock Probe 探针优化 | 第51-52页 |
| ·P-ERCA 反应条件优化 | 第52-53页 |
| ·灵敏度实验 | 第53-54页 |
| ·细胞样品的检测 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 第三章 基于环状指数扩增的石墨烯保护的 MicroRNA 检测 | 第56-72页 |
| 1 引言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-61页 |
| ·材料和仪器 | 第57-58页 |
| ·扩增反应 | 第58页 |
| ·MicroRNA 酶切反应 | 第58-59页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第59页 |
| ·荧光光谱测量 | 第59页 |
| ·细胞实验和 RNA 提取 | 第59页 |
| ·分子动态模拟 | 第59-60页 |
| ·结合自由能的计算 | 第60-61页 |
| 3 结果与讨论 | 第61-69页 |
| ·石墨烯保护的靶 microRNA 的稳定性 | 第61页 |
| ·石墨烯对不同核酸的吸附 | 第61-64页 |
| ·基于石墨烯环状指数扩增反应原理 | 第64-66页 |
| ·动力学实验 | 第66-67页 |
| ·特异性实验 | 第67页 |
| ·反应条件的优化 | 第67-68页 |
| ·灵敏度实验 | 第68-69页 |
| ·细胞样品的检测 | 第69页 |
| 4 结论 | 第69-72页 |
| 第四章 基于石墨烯的 MicroRNA 细胞成像 | 第72-86页 |
| 1 引言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-74页 |
| ·材料和仪器 | 第72-73页 |
| ·扩增反应 | 第73页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第73页 |
| ·荧光光谱测量 | 第73-74页 |
| ·细胞实验和 RNA 提取 | 第74页 |
| ·MTT 实验 | 第74页 |
| 3 结果与讨论 | 第74-83页 |
| ·反应原理 | 第74-75页 |
| ·HCR 反应的凝胶电泳 | 第75-76页 |
| ·HCR/GO 反应的荧光光谱 | 第76页 |
| ·灵敏度实验 | 第76-77页 |
| ·HCR 时间优化 | 第77页 |
| ·GO 浓度猝灭优化 | 第77-78页 |
| ·反应动力学 | 第78-79页 |
| ·特异性实验 | 第79页 |
| ·细胞定量实验 | 第79-80页 |
| ·TEM | 第80-81页 |
| ·MTT 实验 | 第81-82页 |
| ·细胞成像 | 第82-83页 |
| 4 结论 | 第83-86页 |
| 第五章 基于石墨烯的 MicroRNA 细胞多色成像 | 第86-94页 |
| 1 引言 | 第86页 |
| 2 材料与方法 | 第86-87页 |
| ·材料和仪器 | 第86页 |
| ·扩增反应 | 第86页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第86-87页 |
| ·荧光光谱测量 | 第87页 |
| ·细胞实验和 RNA 提取 | 第87页 |
| ·MTT 实验 | 第87页 |
| 3 结果与讨论 | 第87-92页 |
| ·反应原理 | 第87-88页 |
| ·体外双色成像 | 第88-89页 |
| ·高丰度 MicroRNA 细胞内成像 | 第89-90页 |
| ·低丰度 MicroRNA 细胞内成像 | 第90页 |
| ·高、低丰度 MicroRNA 细胞内成像对照 | 第90-91页 |
| ·细胞内两种 MicroRNA 同时成像 | 第91-92页 |
| 4 结论 | 第92-94页 |
| 第六章 总结与展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 附录 | 第106-114页 |
| 攻读学位期间发表的学术论著 | 第114页 |
| 攻读学位期间所参与的课题 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
