| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-19页 |
| ·传染性喉气管炎及其流行病学 | 第14-15页 |
| ·ILTV的病原学特性 | 第15-16页 |
| ·病毒形态学 | 第15页 |
| ·病毒生长特性 | 第15-16页 |
| ·gG蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| ·gC蛋白的研究进展 | 第17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-19页 |
| 第二章 ILTV-LJS09在LMH细胞上生长特性的研究 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·病毒与细胞 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·实验仪器设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-22页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的连续传代 | 第20-21页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的病变观察 | 第21页 |
| ·电镜观察病毒 | 第21页 |
| ·间接免疫荧光法(IFA)检测病毒 | 第21页 |
| ·病毒TCID_(50)的测定 | 第21页 |
| ·病毒不同滴度对LMH细胞的感染试验 | 第21-22页 |
| ·接毒最佳孵育时间的测定 | 第22页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的生长曲线 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-26页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的适应 | 第22页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的病变特征 | 第22-24页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上增殖的证据 | 第24页 |
| ·病毒最佳MOI的确定 | 第24-25页 |
| ·接毒的最佳孵育时间 | 第25-26页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的生长曲线 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-30页 |
| ·验证ILTV-LJS09株是否能在LMH细胞上增殖的必要性 | 第26-27页 |
| ·ILTV-LJS09能够在LMH细胞上增殖的证据 | 第27页 |
| ·ILTV-LJS09在LMH细胞上的生长特性 | 第27-30页 |
| 第三章 ILTV-IJS09gG基因的原核表达、单抗制备及初步应用 | 第30-44页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·细胞、病毒及阳性血清及实验动物 | 第30页 |
| ·载体、菌株及主要试剂 | 第30页 |
| ·实验仪器设备 | 第30页 |
| ·引物设计与合成 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-38页 |
| ·病毒基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·gG基因的PCR扩增与纯化 | 第31-32页 |
| ·gG基因表达载体的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| ·gG基因的原核表达与SDS-PAGE分析 | 第33页 |
| ·目的蛋白His-gG-gG的纯化与抗原性分析 | 第33-34页 |
| ·动物免疫 | 第34页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第34页 |
| ·细胞融合 | 第34-35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第35-36页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆、冻存 | 第36页 |
| ·McAb腹水的制备及其纯化 | 第36-37页 |
| ·McAb的鉴定 | 第37页 |
| ·McAb的初步应用 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·gG基因的PCR扩增 | 第38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·His-gG-gG表达产物及纯化产物的SDS-PAGE | 第39页 |
| ·表达产物的Western-blot检测 | 第39页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第39-40页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第40页 |
| ·McAb腹水的制备及其纯化 | 第40-41页 |
| ·McAb亚类鉴定 | 第41页 |
| ·McAb的Western blot鉴定 | 第41页 |
| ·单抗效价及杂交瘤细胞株抗体分泌稳定性的测定 | 第41-42页 |
| ·IFA分析 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 ILTV-LJS09 gC基因的原核表达、多抗制备、细胞定位及功能研究 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试验动物 | 第44页 |
| ·病毒、细胞及阳性血清 | 第44页 |
| ·菌株、载体及主要试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·引物设计与合成 | 第44-45页 |
| ·gC基因PCR扩增与表达载体的构建 | 第45页 |
| ·目的蛋白His-gC的原核表达与SDS-PAGE分析 | 第45页 |
| ·目的蛋白His-gC的纯化与抗原性分析 | 第45页 |
| ·高免血清的制备 | 第45页 |
| ·ELISA检测抗体效价 | 第45页 |
| ·Western blot分析抗体特异性 | 第45-46页 |
| ·IFA分析抗体特异性 | 第46页 |
| ·ILTV gC蛋白的细胞定位 | 第46页 |
| ·gC抗体处理对病毒的CTCS的影响 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-52页 |
| ·gC基因PCR扩增 | 第46页 |
| ·gC基因的克隆与鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白His-gC的表达及纯化 | 第47页 |
| ·重组蛋白His-gC的抗原性分析 | 第47-48页 |
| ·抗ILTV gC抗体的效价 | 第48-49页 |
| ·Western blot分析抗ILTV gC抗体的特异性 | 第49-50页 |
| ·IFA分析抗ILTV gC抗体特异性 | 第50页 |
| ·gC蛋白的细胞定位 | 第50页 |
| ·gC抗体处理对病毒的CTCS的影响 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
