| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1 Bt毒素Cry1A的作用机理 | 第11-14页 |
| 2 Bt毒素受体—氨肽酶N | 第14-19页 |
| ·氨肽酶的结构特征 | 第14-15页 |
| ·氨肽酶的分类 | 第15-17页 |
| ·APN在昆虫对Bt抗性上的研究 | 第17-19页 |
| 3 Bt毒素受体—ABC转运蛋白 | 第19-22页 |
| ·ABC转运蛋白的作用和结构 | 第19-20页 |
| ·ABCC2在昆虫对Bt抗性上的研究 | 第20-22页 |
| 4 RNAi在Bt抗性机理研究中的应用 | 第22-25页 |
| ·RNA干扰在鳞翅目昆虫中的应用 | 第23-25页 |
| ·RNA干扰在Bt抗性机理研究中的应用 | 第25页 |
| 5 小菜蛾Bt抗性的研究进展 | 第25-27页 |
| ·小菜蛾的发生及危害 | 第25-26页 |
| ·小菜蛾Bt抗性的研究进展 | 第26-27页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 小菜蛾PxAPN2基因mRNA表达水平下降与Cry1Ac抗性的相关性 | 第29-43页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·供试昆虫 | 第30页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第30-31页 |
| ·小菜蛾cDNA模板制备 | 第31-32页 |
| ·dsRNA的制备 | 第32-34页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第34-35页 |
| ·饲喂dsRNA幼虫的生测 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-41页 |
| ·dsRNA的制备 | 第35-36页 |
| ·PCR产物融解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第36-38页 |
| ·品系间PxAPN2基因相对表达量比较 | 第38-39页 |
| ·PxAPN2基因沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 RNAi敲减各品系PxAPN2基因的表达对Cry1Ac敏感性的影响 | 第43-57页 |
| 摘要 | 第43-44页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·供试昆虫 | 第44页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第44-45页 |
| ·链RNA表达载体构建 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌HT115感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·dsRNA在大肠杆菌中的表达 | 第46-47页 |
| ·喂食表达dsRNA细菌液的试验方法 | 第47页 |
| ·饲喂dsRNA幼虫的生测 | 第47页 |
| ·目标基因表达量分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-54页 |
| ·dsRNA表达载体构建 | 第47-49页 |
| ·dsRNA在大肠杆菌中的表达 | 第49页 |
| ·PxAPN2基因沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第49-54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 小菜蛾PxABCC2基因的克隆及在各品系间的表达量比较 | 第57-77页 |
| 摘要 | 第57-58页 |
| 1 材料与方法 | 第58-63页 |
| ·供试昆虫 | 第58页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第58-59页 |
| ·小菜蛾cDNA模板制备 | 第59页 |
| ·PCR反应 | 第59-60页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第60页 |
| ·连接反应 | 第60页 |
| ·转化反应 | 第60-61页 |
| ·扩大培养 | 第61页 |
| ·目标片段检测 | 第61页 |
| ·测序与分析 | 第61页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第61-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-76页 |
| ·敏感及抗性品系ABCC2基因的克隆 | 第63-73页 |
| ·PCR产物融解曲线和扩增效率一致性分析 | 第73-75页 |
| ·品系间PxABCC2基因相对表达量比较 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 第五章 PxABCC2基因与Cry1Ac抗性的遗传连锁分析 | 第77-85页 |
| 摘要 | 第77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-81页 |
| ·供试昆虫 | 第77页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第77-78页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第78-79页 |
| ·PxABCC2基因组全长克隆 | 第79-80页 |
| ·抗性遗传连锁分析 | 第80-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-83页 |
| ·敏感及抗性品系ABCC2基因组的克隆 | 第81-82页 |
| ·遗传连锁 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 全文总结 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
