| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一部分 泛素连接酶RNF168 RING结构域的结构与功能研究 | 第12-91页 |
| 第一章 绪论 | 第12-51页 |
| ·泛素简介 | 第12-24页 |
| ·泛素的结构特征 | 第12-15页 |
| ·泛素化过程 | 第15-16页 |
| ·泛素化形式 | 第16-19页 |
| ·泛素结合结构域 | 第19-24页 |
| ·泛素连接酶 | 第24-30页 |
| ·RING型泛素连接酶 | 第25-28页 |
| ·U-box型泛素连接酶 | 第28-29页 |
| ·HECT型泛素连接酶 | 第29-30页 |
| ·组蛋白的泛素化调控 | 第30-38页 |
| ·H2B的单泛素化 | 第32-33页 |
| ·H2A的单泛素化 | 第33-35页 |
| ·组蛋白变体H2A.Z和macroH2A1.2的单泛素化 | 第35页 |
| ·组蛋白泛素化与DNA双链损伤修复 | 第35-38页 |
| ·选题意义及研究内容 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-51页 |
| 第二章 研究结果与讨论 | 第51-91页 |
| ·引言 | 第51-53页 |
| ·实验材料与方法 | 第53-69页 |
| ·表达载体构建 | 第53-60页 |
| ·蛋白质小量试表达 | 第60-61页 |
| ·蛋白质大量表达与纯化 | 第61-64页 |
| ·RNF8,RNF168与Ubc13的体外结合实验 | 第64-67页 |
| ·免疫共沉淀和Western Blot | 第67页 |
| ·免疫荧光染色 | 第67-68页 |
| ·RNF8,RNF168的结晶条件筛选 | 第68-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-86页 |
| ·RNF168促进DNA双链损伤处的泛素化 | 第69-70页 |
| ·RNF8,RNF168和Ubc13的分子克隆及蛋白试表达 | 第70-71页 |
| ·RNF8,RNF168片段的纯化及RNF168(1-111)的晶体 | 第71-72页 |
| ·RNF168(1-111)晶体的数据收集,结构模型的建立与质量评估 | 第72-76页 |
| ·RNF168(1-111)的整体结构 | 第76-77页 |
| ·RNF168(1-111)与TRAF6,CHIP,RNF8的序列比较 | 第77-78页 |
| ·RNF168(1-111)与TRAF6,CHIP,RNF8的结构比较 | 第78-79页 |
| ·RNF168(1-111)与Ubc13可能的结合位点 | 第79-82页 |
| ·RNF168与Ubc13不能形成稳定的结合 | 第82-84页 |
| ·RNF8与RNF168的RING结构域在功能上不能互相替换 | 第84-86页 |
| ·本章总结与讨论 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第二部分 PCNA与MTH2,TRAIP的相互作用研究 | 第91-112页 |
| 第三章 绪论 | 第91-102页 |
| ·PCNA的功能 | 第91-94页 |
| ·PCNA在基因复制中的作用 | 第92页 |
| ·PCNA在DNA修复中的作用 | 第92-94页 |
| ·PCNA与众多蛋白相互作用的分子机制 | 第94-98页 |
| ·PCNA的结构 | 第94-95页 |
| ·PCNA与其它蛋白相互作用的结构基础 | 第95-96页 |
| ·PCNA的翻译后修饰 | 第96-98页 |
| ·选题意义及研究内容 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 第四章 研究结果与讨论 | 第102-112页 |
| ·引言 | 第102-103页 |
| ·实验材料与方法 | 第103-106页 |
| ·表达载体构建 | 第103-105页 |
| ·蛋白质小量试表达 | 第105页 |
| ·蛋白质大量表达与纯化 | 第105页 |
| ·MTH2的晶体生长 | 第105页 |
| ·PCNA与TRAIP,PCNA与MTH2的体外结合实验 | 第105-106页 |
| ·实验结果与讨论 | 第106-110页 |
| ·PCNA,MTH2,TRAIP的分子克隆 | 第106页 |
| ·PCNA,MTH2,TRAIP的试表达 | 第106页 |
| ·PCNA,MTH2的纯化 | 第106-107页 |
| ·PCNA与TRAIP的体外结合实验 | 第107-109页 |
| ·PCNA与MTH2的体外结合实验 | 第109-110页 |
| ·本章小结 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-112页 |
| 附录 实验所用溶液配制 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第115页 |
