摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第10-12页 |
第二章 材料与方法 | 第12-27页 |
·材料和仪器 | 第12-15页 |
·试剂 | 第12页 |
·主要仪器 | 第12-13页 |
·Western blot分析试剂 | 第13-15页 |
·方法 | 第15-27页 |
·重组质粒载体EGFP-N1-BDNF的构建 | 第15-22页 |
·目的基因的扩增 | 第15-16页 |
·载体pUCm-T-BDNF的构建及鉴定 | 第16-18页 |
·重组表达质粒EGFP-N1-BDNF的构建和鉴定 | 第18-22页 |
·转染 | 第22-24页 |
·细胞换液、培养、种板及传代 | 第22-23页 |
·脂质体及PI修饰纳米介导两种质粒载体转染Hela细胞 | 第23页 |
·脂质体及PI修饰纳米介导两种质粒载体转染BMSC细胞 | 第23-24页 |
·Western blot检测BDNF基因的表达情况 | 第24-27页 |
·总蛋白的提取 | 第24页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第24-26页 |
·免疫反应 | 第26页 |
·化学发光、显影、定影 | 第26-27页 |
第三章 结果 | 第27-37页 |
·EGFP-N1-BDNF真核质粒载体测序结果及酶切鉴定 | 第27-29页 |
·脂质体及纳米介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定 | 第29-31页 |
·脂质体介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定 | 第29-30页 |
·纳米介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定 | 第30-31页 |
·脂质体及纳米介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定 | 第31-33页 |
·脂质体介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定 | 第31-32页 |
·纳米介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定 | 第32-33页 |
·Western blot检测BDNF蛋白的表达 | 第33-34页 |
附图 | 第34-37页 |
第四章 讨论 | 第37-38页 |
第五章 结论 | 第38-39页 |
第六章 本研究的意义及待解决的问题 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-41页 |
综述 | 第41-52页 |
参考文献 | 第48-52页 |
攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |