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重组质粒EGFP-N1-BDNF的构建及转染

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-9页
符号说明第9-10页
第一章 前言第10-12页
第二章 材料与方法第12-27页
   ·材料和仪器第12-15页
     ·试剂第12页
     ·主要仪器第12-13页
     ·Western blot分析试剂第13-15页
   ·方法第15-27页
     ·重组质粒载体EGFP-N1-BDNF的构建第15-22页
       ·目的基因的扩增第15-16页
       ·载体pUCm-T-BDNF的构建及鉴定第16-18页
       ·重组表达质粒EGFP-N1-BDNF的构建和鉴定第18-22页
     ·转染第22-24页
       ·细胞换液、培养、种板及传代第22-23页
       ·脂质体及PI修饰纳米介导两种质粒载体转染Hela细胞第23页
       ·脂质体及PI修饰纳米介导两种质粒载体转染BMSC细胞第23-24页
     ·Western blot检测BDNF基因的表达情况第24-27页
       ·总蛋白的提取第24页
       ·SDS-PAGE电泳第24-26页
       ·免疫反应第26页
       ·化学发光、显影、定影第26-27页
第三章 结果第27-37页
   ·EGFP-N1-BDNF真核质粒载体测序结果及酶切鉴定第27-29页
   ·脂质体及纳米介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定第29-31页
     ·脂质体介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定第29-30页
     ·纳米介导质粒载体转染Hela细胞后的免疫荧光鉴定第30-31页
   ·脂质体及纳米介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定第31-33页
     ·脂质体介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定第31-32页
     ·纳米介导质粒载体转染BMSC细胞后的免疫荧光鉴定第32-33页
   ·Western blot检测BDNF蛋白的表达第33-34页
 附图第34-37页
第四章 讨论第37-38页
第五章 结论第38-39页
第六章 本研究的意义及待解决的问题第39-40页
参考文献第40-41页
综述第41-52页
 参考文献第48-52页
攻读硕士学位期间主要研究成果第52-53页
致谢第53-54页

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