摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
缩略词表 | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-21页 |
第一章 甲型流感病毒研究进展 | 第11-18页 |
1 流感病毒病原学 | 第11-15页 |
·流感病毒概述 | 第11-12页 |
·甲型流感病毒的基因组结构 | 第12-13页 |
·甲型流感病毒的流行和现状 | 第13-15页 |
·甲型流感病毒的流行 | 第13-14页 |
·甲型流感病毒的现状 | 第14-15页 |
2 甲型流感病毒抗原性变异研究进展 | 第15-18页 |
·血凝素蛋白抗原表位 | 第15-16页 |
·甲型流感病毒抗原性变异研究进展 | 第16-18页 |
第二章 反向遗传学技术在流感病毒中的应用 | 第18-21页 |
1 反向遗传学 | 第18页 |
2 流感病毒反向遗传平台的搭建 | 第18-19页 |
3 反向遗传学技术在流感病毒中的应用 | 第19-21页 |
·流感病毒基础研究应用 | 第19页 |
·流感病毒疫苗应用 | 第19-21页 |
第二篇 试验研究 | 第21-44页 |
第三章 长春市南关区 2009-2010 年 H1N1 流感病毒 HA、NA 基因分析 | 第21-29页 |
1 材料与方法 | 第21-23页 |
·病毒 | 第21页 |
·引物设计与合成 | 第21-22页 |
·试剂 | 第22页 |
·实验仪器及设备 | 第22页 |
·软件 | 第22页 |
·病毒总 RNA 提取 | 第22页 |
·反转录(RT) | 第22-23页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第23页 |
·序列拼接比对 | 第23页 |
2 结果 | 第23-28页 |
·RT-PCR | 第23-24页 |
·测序结果 | 第24页 |
·HA 同源性分析 | 第24-25页 |
·HA 核苷酸进化分析 | 第25-26页 |
·NA 同源性分析 | 第26-27页 |
·NA 核苷酸进化分析 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
第四章 应用反向遗传技术构建 XD 突变株 | 第29-40页 |
1 材料与方法 | 第29-36页 |
·病毒 | 第29页 |
·细胞 | 第29页 |
·引物 | 第29-30页 |
·试剂 | 第30页 |
·载体 | 第30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·菌种 | 第31页 |
·实验仪器及设备 | 第31页 |
·动物 | 第31页 |
·PBD 载体处理 | 第31-32页 |
·RT-PCR 扩增 XD 全基因组片段 | 第32页 |
·PCR 产物处理 | 第32-33页 |
·转染质粒构建 | 第33页 |
·转化 | 第33页 |
·摇菌 | 第33页 |
·提取质粒 | 第33-34页 |
·XD-HA 基因点突变质粒构建 | 第34页 |
·8 质粒共转染细胞拯救病毒 | 第34-35页 |
·红细胞凝集实验 | 第35页 |
·鸡胚半数感染剂量(EID50) | 第35页 |
·组织半数感染量(TCID50) | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-38页 |
·XD 全基因转染质粒构建 | 第36页 |
·XD-HA 点突变转染质粒构建 | 第36-38页 |
·病毒的拯救 | 第38页 |
·拯救病毒病毒毒力 | 第38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
·影响病毒拯救效率的因素 | 第39页 |
·应用反向遗传技术时应注意的问题 | 第39-40页 |
第五章 甲型 H1N1 流感病毒 XD 株抗原性变异研究 | 第40-44页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·病毒 | 第40页 |
·实验动物 | 第40页 |
·试剂 | 第40页 |
·实验仪器及设备 | 第40页 |
·免疫小鼠 | 第40页 |
·制备血清 | 第40页 |
·Calium saline solution 配制 | 第40-41页 |
·1.5 % Sodium citrate solution 配制 | 第41页 |
·受体破坏酶(RDE 工作液)配制 | 第41页 |
·RDE 工作液处理血清 | 第41页 |
·血凝抑制试验(HI) | 第41页 |
·交叉血凝抑制实验 | 第41-42页 |
2 结果 | 第42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
全文总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简历 | 第72-73页 |
导师简介 | 第73-74页 |