| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-27页 |
| ·研究问题的由来 | 第11-12页 |
| ·真核生物启动子的结构和特征 | 第12-15页 |
| ·基本转录因子 | 第12-13页 |
| ·核心启动子 | 第13-15页 |
| ·启动子在植物基因工程中的研究及应用 | 第15-23页 |
| ·组成型启动子 | 第15-16页 |
| ·组织器官特异型启动子 | 第16-20页 |
| ·诱导型启动子 | 第20-22页 |
| ·向启动子 | 第22页 |
| ·人工合成启动子 | 第22-23页 |
| ·研究启动子常用的方法与技术 | 第23-26页 |
| ·全长启动子的分离克隆 | 第23页 |
| ·启动子的生物信息学分析 | 第23页 |
| ·启动子表达模式的验证 | 第23-24页 |
| ·启动子的缺失分析 | 第24页 |
| ·凝胶阻滞试验 | 第24-25页 |
| ·酵母单杂交技术 | 第25-26页 |
| ·目的与意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·水稻品种 | 第27页 |
| ·载体及菌株 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·候选基因的基本信息 | 第27-28页 |
| ·DX35的基本信息 | 第27-28页 |
| ·YY2的基本信息 | 第28页 |
| ·YY4的基本信息 | 第28页 |
| ·YY7的基本信息 | 第28页 |
| ·YY6的基本信息 | 第28页 |
| ·明恢63基因组DNA及不同组织RNA的反转录 | 第28-29页 |
| ·候选基因表达模式的鉴定 | 第29页 |
| ·DX35表达模式的鉴定 | 第29页 |
| ·YY2表达模式的鉴定 | 第29页 |
| ·YY4、YY7和YY6表达模式的鉴定 | 第29页 |
| ·启动子的分离克隆及序列分析 | 第29-31页 |
| ·DXCP35的分离克隆及序列分析 | 第29-30页 |
| ·P_(YY2)的分离克隆及序列分析 | 第30页 |
| ·P_(YY4)、P_(YY7)和P_(YY6)的分离克隆及序列分析 | 第30-31页 |
| ·启动子的表达载体构建及其遗传转化 | 第31-33页 |
| ·DXCP35及其系列缺失的表达载体构建及其遗传转化 | 第31页 |
| ·P_(YY2)及其系列缺失的表达载体构建及其遗传转化 | 第31-32页 |
| ·启动子P_(YY4)、P_(YY7)和P_(YY6)的表达载体构建及其遗传转化 | 第32-33页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR阳性检测 | 第33页 |
| ·阳性植株的组织化学染色 | 第33-35页 |
| ·P_(YY2)及其缺失片段转基因植株的GUS活性定量检测 | 第35-38页 |
| ·相关试剂准备 | 第36页 |
| ·总蛋白的提取 | 第36-37页 |
| ·总蛋白浓度测定 | 第37页 |
| ·GUS活性测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·候选基因表达模式的鉴定 | 第38页 |
| ·启动子的分离克隆 | 第38-39页 |
| ·启动子DXCP35及其缺失片段的分离克隆 | 第38-39页 |
| ·启动子P_(YY2)及其缺失片段的分离克隆 | 第39页 |
| ·启动子P_(YY4)、P_(YY7)和P_(YY6)的分离克隆 | 第39页 |
| ·启动子的序列分析 | 第39-42页 |
| ·启动子组织化学染色结果 | 第42-46页 |
| ·DXCP35组织化学染色结果及相应缺失片段的表达模式 | 第42-44页 |
| ·P_(YY2)组织化学染色结果及相应缺失片段的表达模式 | 第44页 |
| ·P_(YY4)、P_(YY7)和P_(YY6)组织化学染色结果 | 第44-46页 |
| ·启动子P_(YY2)及其相应缺失片段GUS活性定量检测 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·胚乳特异表达启动子DXCP35 | 第48页 |
| ·绿色组织特异表达启动子P_(YY2) | 第48-49页 |
| ·绿色组织特异表达启动子P_(YY4)和P_(YY7)以及启动子P_(YY6) | 第49-50页 |
| ·有关报告基因 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 附录1 启动子DXCP35的核苷酸序列 | 第61-62页 |
| 附录2 启动子P_(YY2)的核苷酸序列 | 第62-64页 |
| 附录3 启动子P_(YY4)的核苷酸序列 | 第64-66页 |
| 附录4 启动子P_(YY7)的核苷酸序列 | 第66-68页 |
| 附录5 启动子P_(YY6)的核苷酸序列 | 第68-70页 |
| 附录6 植物表达载体示意图 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
