| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-30页 |
| 实验材料 | 第14-17页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·主要实验仪器 | 第14-15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15-17页 |
| 实验方法 | 第17-30页 |
| 一、基底动脉平滑肌细胞原代的制作、鉴定及观察大鼠基底动脉及平滑肌细胞 Cx43、Cx40 的表达和分布，构建 CVS 细胞模型 | 第17-24页 |
| 1. 大鼠基底动脉平滑肌细胞的培养与鉴定 | 第17-21页 |
| ·细胞培养所需液体的配制 | 第18页 |
| ·大鼠基底动脉平滑肌细胞培养 | 第18-20页 |
| ·细胞鉴定 | 第20-21页 |
| 2.免疫荧光观察缝隙连接蛋白 Cx43、Cx40 在大鼠基底动脉组织及平滑肌细胞的表达和分布 | 第21-23页 |
| ·免疫荧光显微镜观察 Cx43、Cx40 在大鼠基底动脉组织的表达和分布 | 第21-22页 |
| ·共聚焦显微镜观察 Cx43、Cx40 在大鼠基底动脉平滑肌细胞的表达和分布 | 第22-23页 |
| 3、建立 OxyHb 诱导的脑血管痉挛细胞模型 | 第23-24页 |
| 二、三重免疫荧光着色标记脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及 PTK等抑制剂后 P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43 的表达变化 II | 第24-25页 |
| ·所需含药物培养基的配制 | 第24页 |
| ·实验分组 | 第24页 |
| ·实验步骤 | 第24-25页 |
| 三、Western blotting 技术检测脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及PTK 等抑制剂后 P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43 蛋白的表达变化 | 第25-30页 |
| ·总蛋白样品制备 | 第25-26页 |
| ·样品蛋白含量的测定 | 第26页 |
| ·配制 5%积层胶及 12%分离胶 | 第26页 |
| ·灌胶及上样 | 第26-27页 |
| ·垂直电泳 | 第27页 |
| ·转膜 | 第27-28页 |
| ·目标蛋白免疫反应 | 第28页 |
| ·目标蛋白化学发光及曝光 | 第28页 |
| ·膜再生 | 第28-29页 |
| ·内参蛋白免疫反应 | 第29页 |
| ·内参蛋白化学发光及曝光 | 第29页 |
| ·图像分析 | 第29页 |
| ·数据统计分析 | 第29-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-35页 |
| ·血管平滑肌细胞的鉴定 | 第30页 |
| ·免疫荧光观察缝隙连接蛋白 Cx43、Cx40 在大鼠基底动脉组织及平滑肌细胞的表达和分布 | 第30页 |
| ·三重免疫荧光着色标记脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及 PTK 等抑制剂后 P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43 的表达变化 | 第30-32页 |
| ·三重免疫荧光着色标记脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及 PTK 等抑制剂后 P-Cx43-S368 及 Cx43 的表达变化 | 第30-31页 |
| ·三重免疫荧光着色标记脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及 PTK 等抑制剂后 P-Cx43-S262 及 Cx43 的表达变化 | 第31-32页 |
| ·Western blotting 分析脑血管痉挛细胞模型中加入 PKC、MAPK 及 PTK 等抑制剂后 P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43 蛋白的表达变化 | 第32-35页 |
| ·OxyHb 诱导的 CVS 细胞模型中 P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43蛋白表达的变化 | 第32页 |
| ·PKC、MAPK 及 PTK 等抑制剂对 OxyHb 诱导的 CVS 细胞模型中P-Cx43-S368、P-Cx43-S262 及 Cx43 蛋白表达的影响 | 第32-35页 |
| 第4章 讨论 | 第35-43页 |
| ·蛛网膜下腔出血（SAH）后脑血管痉挛（CVS） | 第35-36页 |
| ·蛋白激酶 C（PKC）、丝裂原蛋白活化激酶（MAPK）、酪氨酸蛋白激酶（PTK）在脑血管痉挛（CVS）中的作用研究 | 第36-37页 |
| ·缝隙连接通迅（GJIC） | 第37-38页 |
| ·GJ 蛋白 Cx43 磷酸化及其对 GJ 功能的影响 | 第38-40页 |
| ·ＧＪ蛋白 Cx43 磷酸化在 CVS 中作用的研究 | 第40-41页 |
| ·展望 | 第41-43页 |
| 第5章 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附图 | 第51-61页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第61-62页 |
| 综述 | 第62-83页 |
| 综述一 | 第62-73页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 综述二 | 第73-83页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
