| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| ·鸭病毒性肠炎概述 | 第13-16页 |
| ·临床症状与病理剖检 | 第13-14页 |
| ·诊断 | 第14-16页 |
| ·鸭病毒性肠炎的防治 | 第16页 |
| ·鸭肠炎病毒研究进展 | 第16-19页 |
| ·DEV 的生物学特性 | 第16-17页 |
| ·DEV 的分子生物学特性 | 第17-18页 |
| ·鸭肠炎病毒 SORF3 基因和 TK 基因的研究进展 | 第18-19页 |
| ·疱疹病毒载体研究进展 | 第19-20页 |
| ·基因缺失疫苗 | 第19-20页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第20页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·试验动物 | 第22页 |
| ·质粒、载体、菌株、和毒株 | 第22页 |
| ·主要试剂及抗体 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-24页 |
| ·重组病毒转移载体的构建 | 第24-29页 |
| ·重组病毒转移载体的构建策略 | 第24-25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第25页 |
| ·同源臂的扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物的克隆与转化 | 第26页 |
| ·重组阳性质粒的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
| ·左、右同源臂连接 | 第27页 |
| ·pMD18-T-gpt-EGFP 和 pMD18-T-gpt 表达盒的构建 | 第27-28页 |
| ·缺失病毒转移载体的构建 | 第28-29页 |
| ·重组病毒的构建与筛选 | 第29-30页 |
| ·重组转移载体质粒的大量制备 | 第29-30页 |
| ·DEV 全基因组与重组转移载体质粒共转染 | 第30页 |
| ·重组病毒的筛选及纯化 | 第30页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第30-32页 |
| ·引物设计与合成 | 第30-31页 |
| ·重组病毒的 PCR 鉴定 | 第31页 |
| ·DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 基因表达产物的间接免疫荧光检测 | 第31-32页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 生物学特性的基本研究 | 第32-33页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 的理化特性分析 | 第32页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 的体外稳定性分析 | 第32-33页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 与亲本病毒生长曲线的绘制 | 第33页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 与亲本病毒蚀斑直径大小的比较 | 第33页 |
| ·动物试验 | 第33-36页 |
| ·免疫分组 | 第33页 |
| ·DEV 病毒的超离纯化 | 第33-34页 |
| ·咽及泄殖腔棉拭子中基因的检测 | 第34页 |
| ·间接 ELISA 方法检测鸭血清中抗体消长规律 | 第34页 |
| ·中和抗体效价的测定 | 第34-35页 |
| ·病理组织学变化 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-60页 |
| ·重组病毒转移载体的构建 | 第36-40页 |
| ·重组病毒同源臂基因的扩增 | 第36页 |
| ·表达盒基因的获得 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37页 |
| ·左、右同源臂连接结果 | 第37-38页 |
| ·缺失病毒转移载体的构建 | 第38-39页 |
| ·pMD18T-gpt-EGFP 的连接结果 | 第39-40页 |
| ·重组病毒的构建与筛选 | 第40-41页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3 的 PCR 鉴定 | 第41页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔTK 的 PCR 鉴定 | 第41页 |
| ·重组病毒的 IIF 检测 | 第41-43页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 生物学特性的基本研究 | 第43-56页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 的理化特性分析 | 第43页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 的体外稳定性分析 | 第43-53页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 生长曲线的绘制 | 第53-54页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 与亲本病毒蚀斑直径大小的比较 | 第54-56页 |
| ·动物试验 | 第56-60页 |
| ·咽及泄殖腔棉拭子中基因的检测 | 第56-57页 |
| ·间接 ELISA 方法检测鸭血清中抗体消长规律 | 第57-58页 |
| ·中和抗体效价的测定 | 第58页 |
| ·病理组织学变化 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·DEV 缺失病毒的构建 | 第60-61页 |
| ·构建 DEV 缺失病毒的意义 | 第60页 |
| ·缺失位点的选择 | 第60-61页 |
| ·重组病毒筛选方法的选择 | 第61页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组病毒 DEV-ΔS3/DEV-ΔTK 生物学特性的基本研究 | 第62页 |
| ·动物试验结果的分析 | 第62-64页 |
| ·重组病毒的安全性 | 第62页 |
| ·血清抗体效价的测定 | 第62-63页 |
| ·中和抗体效价的测定 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第71页 |
