| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 主要图表 | 第12-13页 |
| 主要英文缩写 | 第13-14页 |
| 文献综述 | 第14-27页 |
| 1 隐孢子虫生物学特性 | 第14-18页 |
| 2 ABC转运蛋白研究进展 | 第18-22页 |
| 3 鼠肠上皮细胞（IEC)的培养研究进展 | 第22-26页 |
| 4 结语 | 第26-27页 |
| 引言 | 第27-28页 |
| 1 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·隐孢子虫CaNBD基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·隐孢子虫卵囊的分离与纯化 | 第31页 |
| ·隐孢子虫基因组的抽提 | 第31页 |
| ·PCR反应 | 第31-32页 |
| ·扩增产物检测 | 第32页 |
| ·胶回收 | 第32页 |
| ·连接 | 第32页 |
| ·转化 | 第32页 |
| ·PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·测序 | 第33页 |
| ·重组克隆质粒的抽提 | 第33页 |
| ·双酶切 | 第33页 |
| ·胶回收 | 第33页 |
| ·CaNBD基因与pEGFP-C1质粒连接 | 第33-34页 |
| ·转化 | 第34页 |
| ·重组表达质粒的抽提 | 第34页 |
| ·PCR鉴定 | 第34页 |
| ·双酶切鉴定 | 第34页 |
| ·测序鉴定 | 第34页 |
| ·小鼠IEC的分离与原代培养 | 第34-37页 |
| ·培养皿的准备 | 第34页 |
| ·组织块培养法 | 第34-35页 |
| ·嗜热菌蛋白酶消化法 | 第35页 |
| ·胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法 | 第35页 |
| ·胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法 | 第35页 |
| ·小鼠IEC的纯化 | 第35-36页 |
| ·小鼠IEC的传代培养 | 第36页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第36页 |
| ·小鼠IEC的免疫鉴定 | 第36-37页 |
| ·真核表达 | 第37页 |
| ·转染后细胞内外离子浓度的测定 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·隐孢子虫CaNBD基因的扩增与真核表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·CaNBD基因PCR扩增结果 | 第38页 |
| ·CaNBD基因测序结果与分析 | 第38-40页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第40页 |
| ·小鼠IEC的培养结果 | 第40-44页 |
| ·组织块培养法 | 第40-41页 |
| ·嗜热菌蛋白酶消化法 | 第41页 |
| ·胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法 | 第41-42页 |
| ·胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法 | 第42页 |
| ·小鼠IEC免疫组化结果 | 第42-43页 |
| ·小鼠IEC免疫荧光结果 | 第43-44页 |
| ·重组质粒转染小鼠IEC | 第44-45页 |
| ·转染细胞内外离子浓度的检测 | 第45-48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| ·安氏隐孢子虫CaNBD基因的扩增 | 第48-49页 |
| ·小鼠IEC细胞的原代培养 | 第49-50页 |
| ·CaNBD蛋白转运功能的研究 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |