| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩写符号 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-41页 |
| 1 GABA的结构与功能 | 第15-28页 |
| ·动物中的GABA | 第15-18页 |
| ·植物中的GABA | 第18-19页 |
| ·微生物中的GABA | 第19-28页 |
| 2 GABA的制备及应用 | 第28-31页 |
| ·植物富集法 | 第29页 |
| ·微生物发酵法 | 第29-31页 |
| 3. 研究目的、意义和研究内容 | 第31-33页 |
| ·研究目的和意义 | 第31页 |
| ·研究内容 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-41页 |
| 第二章 嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆 | 第41-71页 |
| 1. 材料与方法 | 第41-48页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第41-42页 |
| ·嗜热链球菌Y2基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒的转化 | 第43页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因保守区的克隆 | 第43-45页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因全长序列的克隆 | 第45-48页 |
| ·谷氨酸脱羧羧酶序列分析 | 第48页 |
| 2. 结果与分析 | 第48-66页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因保守区的克隆 | 第48-50页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因全长序列的克隆 | 第50-53页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因的序列分析 | 第53-59页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因上游旁邻序列的分析 | 第59-61页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因下游旁邻序列的分析 | 第61-66页 |
| 3. 讨论 | 第66-68页 |
| 4. 本章小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第三章 嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第71-95页 |
| 1. 材料与方法 | 第71-81页 |
| ·菌株与质粒 | 第71-72页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72-73页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第73-74页 |
| ·大肠杆菌质粒的制备 | 第74页 |
| ·GABA测定的色谱条件 | 第74-75页 |
| ·样品处理及衍生化 | 第75页 |
| ·γ-氨基丁酸标准曲线的制作 | 第75页 |
| ·SDS-PAGE步骤 | 第75-76页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建 | 第76-79页 |
| ·重组大肠杆菌的表达 | 第79-81页 |
| 2. 结果与分析 | 第81-90页 |
| ·谷氨酸脱羧酶基因gadB的扩增 | 第81-82页 |
| ·pET-gadB的构建 | 第82-83页 |
| ·pET-DsbA-gadb的构建 | 第83-84页 |
| ·γ-氨基丁酸标准曲线的制作 | 第84-85页 |
| ·gadB基因在大肠杆菌中的非融合表达 | 第85-86页 |
| ·gadB基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第86-90页 |
| 3. 讨论 | 第90-91页 |
| 4. 本章小结 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 第四章 嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因在枯草杆菌中的表达 | 第95-118页 |
| 1. 材料与方法 | 第95-106页 |
| ·菌株与质粒 | 第95-96页 |
| ·试剂 | 第96页 |
| ·主要仪器 | 第96-97页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第97页 |
| ·枯草杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第97页 |
| ·枯草杆菌基因组DNA的提取 | 第97-98页 |
| ·枯草杆菌表达载体pHPQ的构建 | 第98-103页 |
| ·pHPQ-gadB的构建 | 第103页 |
| ·pHUQ-gadB的构建 | 第103-104页 |
| ·pUQSN-gadB的构建 | 第104-105页 |
| ·重组枯草杆菌的表达 | 第105-106页 |
| 2. 结果与分析 | 第106-113页 |
| ·pHPQ的构建 | 第106-108页 |
| ·pHPQ-gadB的构建 | 第108页 |
| ·pHUQ-gadB的构建 | 第108-110页 |
| ·pUQSN-gadB的构建 | 第110-111页 |
| ·重组枯草杆菌的诱导表达 | 第111-113页 |
| 3. 讨论 | 第113-115页 |
| 4. 本章小结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-118页 |
| 全文结论 | 第118-119页 |
| 全文创新点 | 第119-120页 |
| 展望 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第122页 |