| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-14页 |
| 第一部分 综述：无脊椎动物先天免疫研究 | 第14-28页 |
| 引言 | 第14页 |
| 第一章 无脊椎动物先天免疫机制 | 第14-25页 |
| 1. 感受刺激阶段 | 第14-17页 |
| ·病原的模式识别 | 第14-15页 |
| ·病原体相关分子模式 | 第15-16页 |
| ·模式识别受体 | 第16-17页 |
| 2. 信号调制和信号转导阶段 | 第17-22页 |
| ·信号调制与信号放大 | 第17页 |
| ·信号转导 | 第17-22页 |
| 3 免疫效应系统 | 第22-25页 |
| ·酚氧化酶依赖黑化作用系统 | 第22-23页 |
| ·抗生物肽 | 第23-24页 |
| ·细胞凋亡相关基因 | 第24-25页 |
| 第二章 节肢动物TLR信号途径研究进展 | 第25-28页 |
| 1. 前言 | 第25-26页 |
| 2. 昆虫Toll | 第26页 |
| 3. 甲壳动物 | 第26-27页 |
| 4. 结语 | 第27-28页 |
| 第二部分 拟穴青蟹TOLL信号通路关键分子克隆,表达,以及功能研究 | 第28-62页 |
| 第一章 拟穴青蟹cDNA文库构建和Toll信号基因的筛选 | 第28-35页 |
| 一、前言 | 第28-29页 |
| 二、材料和方法 | 第29-32页 |
| 1. 材料 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·血细胞的分离及血浆(无血细胞血淋巴)的制备和各组织采样 | 第29页 |
| ·试剂和仪器 | 第29-30页 |
| 2. 方法 | 第30-32页 |
| ·PCR法检测WSSV感染拟穴青蟹 | 第30-31页 |
| ·cDNA文库的构建及总RNA的提取、检测 | 第31-32页 |
| 三、结果 | 第32-34页 |
| 1 PCR测序检测病毒结果 | 第32页 |
| 2 建库数据分析 | 第32-34页 |
| 四、讨论 | 第34-35页 |
| 第二章 Toll样受体和Spaetzle基因克隆和性质研究 | 第35-47页 |
| 一、前言 | 第35-36页 |
| 二、材料和方法 | 第36-41页 |
| 1. 材料 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| 2. 方法 | 第36-41页 |
| ·反转录第一链长片段的cDNA | 第36-37页 |
| ·Spaetzal和Toll基因全长的获得 | 第37-40页 |
| ·序列分析 | 第40页 |
| ·SpToll和SpSpaetzal的细胞分布 | 第40-41页 |
| ·SpToll和SpSpaetzal的刺激表达谱 | 第41页 |
| 三、结果 | 第41-45页 |
| 1. cDNA全长克隆,和蛋白序列分析 | 第41页 |
| 2. 同源序列比对和进化树分析 | 第41-43页 |
| 3. SpToll和SpSpaetzal的组织分布 | 第43-44页 |
| 4. SpToll和SpSpaetzal的刺激转录组变化 | 第44-45页 |
| 四、讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 ALF克隆和抗菌性质研究 | 第47-62页 |
| 一、前言 | 第47-48页 |
| 二、材料和方法 | 第48-54页 |
| 1 材料 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-54页 |
| ·SpALF的编码区的克隆 | 第48页 |
| ·SpALF的同源性比较和进化树构建 | 第48页 |
| ·抗菌肽SpALF的3D结构模拟 | 第48-49页 |
| ·SpALF的组织分布和刺激转录谱 | 第49页 |
| ·抗菌肽表达载体构建 | 第49-50页 |
| ·抗菌肽表达 | 第50-51页 |
| ·抗菌肽纯化 | 第51-52页 |
| ·细菌结合实验 | 第52-54页 |
| ·细菌生长抑制实验 | 第54页 |
| 三、结果 | 第54-60页 |
| 1. SpALF序列特征和模拟的3D结构 | 第54-55页 |
| 2. 同源比对和进化树 | 第55-57页 |
| 3. SpALF的组织分布和病原刺激时的表达模式分析 | 第57-58页 |
| 4. 蛋白表达和纯化 | 第58页 |
| 5. 细菌生长抑制实验 | 第58-59页 |
| 6. SpALF细菌结合实验 | 第59-60页 |
| 四 讨论 | 第60-62页 |
| 创新性分析 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
| 在读硕士期间发表论文情况 | 第72页 |
