| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-15页 |
| 第一章 携带miR-122 的腺病毒联合化疗药物对肝癌细胞杀伤作用研究 | 第15-40页 |
| ·前言 | 第15-22页 |
| ·肝癌的化学治疗 | 第15-17页 |
| ·MicroRNA 与肿瘤基因治疗 | 第17-19页 |
| ·microRNA-122（miR-122）在肝癌中的研究概况 | 第19-20页 |
| ·本课题来源及研究意义 | 第20-22页 |
| ·实验材料与方法 | 第22-25页 |
| ·生化试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·细胞株系及培养条件 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·细胞有关操作 | 第25-27页 |
| ·腺病毒Ad-miR122 大量扩增与纯化 | 第27页 |
| ·腺病毒Ad-miR122 滴度测定 | 第27-28页 |
| ·CCK-8 检测腺病毒与化疗药物单独或联合使用对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第28-29页 |
| ·腺病毒与化疗药物单独或联合使用对耐药基因表达的影响 | 第29-30页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-37页 |
| ·腺病毒滴度的测定 | 第32页 |
| ·腺病毒Ad-miR122 与化疗药物联合诱导杀伤肿瘤细胞作用 | 第32-35页 |
| ·腺病毒与化疗药物对耐药基因表达的影响 | 第35-36页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第二章 肝癌中miRNA 与表观遗传机制的相互作用研究 | 第40-77页 |
| ·前言 | 第40-46页 |
| ·表观遗传与miRNA 之间相互调控诱发肿瘤形成 | 第40-41页 |
| ·表观遗传调控miRNA 的表达方式及机制 | 第41-43页 |
| ·miRNA 调控表观遗传的方式及机制 | 第43-44页 |
| ·肝癌中的表观遗传现象 | 第44-45页 |
| ·肝癌相关的miRNA 研究现状 | 第45-46页 |
| ·课题设计 | 第46页 |
| ·本课题的来源及意义 | 第46-48页 |
| ·课题来源 | 第46页 |
| ·课题意义 | 第46-47页 |
| ·学位论文的创新点、重点、难点和关键问题 | 第47页 |
| ·课题的实验流程 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第48-50页 |
| ·菌株及质粒 | 第48页 |
| ·工具酶及试剂 | 第48页 |
| ·引物设计与合成 | 第48-49页 |
| ·实验中涉及到的细胞株 | 第49页 |
| ·主要仪器与设备 | 第49页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-66页 |
| ·pMD-18-T-c-myc 载体的构建 | 第50-53页 |
| ·c-myc-IRES-EGFP 的构建 | 第53-55页 |
| ·c-myc-2A-EGFP 质粒的构建 | 第55-57页 |
| ·慢病毒载体Lenti-PGK.P53 的构建 | 第57-60页 |
| ·慢病毒载体Lv-c-myc.IRES 的构建 | 第60-62页 |
| ·慢病毒载体Lv-c-myc.2A 的构建 | 第62-63页 |
| ·质粒的制备纯化 | 第63-64页 |
| ·慢病毒载体Lv-c-myc.2A 和Lv-c-myc.IRES 有效性检验 | 第64页 |
| ·慢病毒的生产 | 第64-65页 |
| ·慢病毒的纯化和感染 | 第65-66页 |
| ·qRT-PCR 检测肝癌细胞系中c-myc mRNA 水平的表达 | 第66页 |
| ·统计学分析 | 第66页 |
| ·实验结果与分析 | 第66-75页 |
| ·病毒载体系统的构建及鉴定结果 | 第66-72页 |
| ·慢病毒载体Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 有效性检验 | 第72页 |
| ·慢病毒Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 的生产 | 第72-73页 |
| ·慢病毒Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 的感染验证 | 第73-74页 |
| ·c-myc 在肝癌细胞系和正常肝细胞株AKN-1 中的表达情况 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 在学期间论文发表情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
