| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章文献综述 | 第11-21页 |
| ·凝乳酶结构与理化特性 | 第11-14页 |
| ·凝乳酶的功能与用途 | 第14-15页 |
| ·凝乳酶和牛奶凝结 | 第14页 |
| ·凝乳酶在医学中的作用 | 第14-15页 |
| ·凝乳酶用于工业 | 第15页 |
| ·凝乳酶的来源 | 第15-16页 |
| ·从动物中提取 | 第15页 |
| ·从植物中提取 | 第15页 |
| ·从微生物中提取 | 第15页 |
| ·基因工程凝乳酶 | 第15-16页 |
| ·重组凝乳酶 | 第16-20页 |
| ·重组凝乳酶的原核表达 | 第16-18页 |
| ·重组凝乳酶的真核表达 | 第18-19页 |
| ·基因工程凝乳酶的应用前景 | 第19-20页 |
| ·研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章试验研究 | 第21-51页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第23页 |
| ·毕赤酵母菌株 | 第23页 |
| ·培养基及抗生素 | 第23-24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·工具酶及其他试剂 | 第25页 |
| ·主要试验仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·试验羊选择与皱胃组织采样 | 第25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·总RNA 提取 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26页 |
| ·PCR 及PCR 产物酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·连接、转化、鉴定 | 第27-28页 |
| ·序列与结构分析 | 第28-29页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶原前体基因毕赤酵母表达质粒的构建 | 第29-32页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第32-33页 |
| ·毕赤酵母转化子的PCR 鉴定 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-49页 |
| ·皱胃组织总RNA、PCR、克隆与序列测定 | 第34-38页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶原前体基因毕赤酵母整合质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·毕赤酵母的转化与鉴定 | 第40-41页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶原的核苷酸序列及推导的氨基酸序列的序列比对 | 第41-44页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶的物理性质分析 | 第44页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶的二级结构分析 | 第44-46页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶的信号肽分析 | 第46-47页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶三级结构分析 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·西农萨能羊凝乳酶原前体基因毕赤酵母表达载体的构建 | 第49页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第49-50页 |
| ·西农萨能羊基因工程重组凝乳酶在乳酪及生产中的应用前景 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附表一 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
