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西农萨能羊乳腺脂肪酸合酶(FAS)基因及其启动子的克隆、测序与分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·山羊奶脂肪酸组成及其营养价值第12-13页
   ·乳腺脂肪酸的合成机制第13-14页
   ·乳腺中脂肪酸合成的种间差异第14-15页
   ·山羊奶膻味研究现状第15-17页
   ·短、中链脂肪酸与FAS 合成调控第17-18页
     ·高等植物脂肪酸合成与FAS 的调控第17页
     ·反刍动物乳腺脂肪酸合成机理的研究进展第17-18页
   ·非反刍动物脂肪酸合成与 FAS 的调控第18页
   ·反刍动物脂肪酸合成与FAS 的调控第18-19页
   ·脂肪酸合酶(FAS)的研究进展第19-22页
     ·脂肪酸合酶的概念及功能第19-21页
     ·脂肪酸合酶基因的研究进展第21-22页
   ·生物信息学分析简介第22-23页
   ·本研究的目的意义第23-24页
第二章 西农萨能羊乳腺脂肪酸合酶(FAS)基因cDNA 序列全长的克隆与序列分析第24-48页
   ·材料与方法第24-33页
     ·样品采集第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·引物设计与合成第25-26页
     ·西农萨能羊乳腺组织总RNA 的提取及第一条cDNA 链的生成第26-27页
     ·FAS 基因KS 域(ex0112-ex0119)的扩第27页
     ·FAS 基因AT/MT 域(ex0118-ex01116)的扩第27-28页
     ·FAS 基因DH-ACP 域(ex01116-ex01139)的扩第28页
     ·FAS 基因TE 域(ex01139-ex01142)的扩第28页
     ·FAS 基因3′-UTR 的扩增(3′RACE)第28-29页
     ·FAS 基因5′-UTR 的扩增(5′RACE)第29-32页
     ·目的基因片段的纯化第32页
     ·目的基因的连接和转化第32-33页
     ·阳性克隆产物的鉴定第33页
     ·序列拼接获得西农萨能羊乳腺 FAS 基因cDNA 全长第33页
     ·序列分析第33页
   ·结果与分析第33-43页
     ·乳腺总RNA 的提取第33-34页
     ·FAS 基因KS、AT/MT、DH-ACP 及TE 功能域的克隆第34-35页
     ·FAS 基因3′非翻译区(3′-UTR)和5′非翻译区(5′-UTR)的克隆第35-36页
     ·西农萨能羊乳腺FAS 基因cDNA 全长序列的获得第36-42页
     ·FAS 基因推导的氨基酸序列分析第42页
     ·西农萨能羊FAS 基因各功能域的确定第42-43页
     ·西农萨能羊FAS 基因序列同源性和结构预测分析第43页
   ·讨论第43-48页
     ·关于PCR 引物的设计第43-44页
     ·关于总RNA 提取及目的基因的扩增第44-45页
     ·关于FAS 基因的调控与山羊乳短、中链脂肪酸合成的关系第45-46页
     ·FAS 基因在不同组织中的表达第46-48页
第三章 西农萨能羊脂肪酸合酶(FAS)基因启动子序列的克隆与序列分析第48-54页
   ·材料和方法第48-50页
     ·样品采集第48页
     ·主要试剂第48页
     ·基因组DNA 的提取第48-49页
     ·FAS 基因启动子扩增引物设计第49页
     ·FAS 基因启动子克隆及鉴定第49-50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·FAS 基因启动子序列的克隆第50页
     ·FAS 基因启动子序列分析第50-52页
   ·讨论第52-54页
第四章 西农萨能羊不同泌乳阶段乳腺脂肪酸合酶(FAS)基因表达丰度研究第54-58页
   ·材料和方法第54-56页
     ·样品采集第54页
     ·总RNA 提取第54页
     ·cDNA 第一条链的生成第54-55页
     ·PCR 引物设计第55页
     ·实时定量PCR 分析第55-56页
   ·结果与分析第56-57页
     ·总RNA 的提取及检测第56页
     ·实时定量PCR第56-57页
   ·讨论第57-58页
主要结论第58-59页
参考文献第59-64页
附录第64-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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