抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及胶体金诊断试纸条的研制
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-18页 |
| 1. 鹅细小病毒病的研究概述 | 第11-15页 |
| ·病原体的特征 | 第11-12页 |
| ·流行病学研究 | 第12-13页 |
| ·临床症状 | 第13页 |
| ·病理变化 | 第13页 |
| ·鹅细小病毒病的诊断 | 第13-14页 |
| ·鹅细小病毒病的防治 | 第14-15页 |
| 2. 单克隆抗体的研究进展及应用 | 第15-16页 |
| 3. 胶体金快速诊断技术的研究进展及应用 | 第16-18页 |
| 材料与方法 | 第18-31页 |
| 1. 材料 | 第18-23页 |
| ·病毒、血清、实验动物及细胞 | 第18页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
| ·所需主要溶液及培养基的配制 | 第19-22页 |
| ·试验主要仪器 | 第22-23页 |
| 2. 方法 | 第23-31页 |
| ·免疫抗原的制备 | 第23-24页 |
| ·免疫动物 | 第24页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第24页 |
| ·融合用骨髓瘤细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第25页 |
| ·脾细胞的制备 | 第25页 |
| ·细胞融合及筛选 | 第25-26页 |
| ·腹水的制备及效价测定 | 第26页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第26页 |
| ·单克隆抗体Western-blot分析 | 第26页 |
| ·兔抗GPV血清的纯化及效价测定 | 第26-27页 |
| ·单克隆抗体的纯化及效价测定 | 第27页 |
| ·制备胶体金器皿的准备 | 第27-28页 |
| ·胶体金的制备 | 第28页 |
| ·胶体金标记探针的制备 | 第28-29页 |
| ·试纸条的制备 | 第29-30页 |
| ·结果判定 | 第30页 |
| ·敏感性试验 | 第30页 |
| ·特异性试验 | 第30页 |
| ·重复性试验 | 第30页 |
| ·稳定性试验 | 第30页 |
| ·试纸条的初步应用 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-41页 |
| 1. 单克隆抗体的制备结果 | 第31-34页 |
| ·抗原纯化结果 | 第31页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备结果 | 第31-32页 |
| ·间接ELISA方法反应条件的筛选结果 | 第32页 |
| ·细胞融合结果 | 第32-33页 |
| ·MAb亚型鉴定结果 | 第33页 |
| ·腹水的效价检测结果 | 第33页 |
| ·单克隆抗体的Western-blot分析 | 第33-34页 |
| 2 胶体金试纸条制备结果 | 第34-41页 |
| ·兔抗GPV抗体的纯化后效价测定结果 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体纯化后效价测定及含量测定结果 | 第35页 |
| ·胶体金颗粒的制备结果 | 第35页 |
| ·单克隆抗体与胶体金结合的最佳pH确定 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体与胶体金结合的最佳浓度确定 | 第36-37页 |
| ·金标垫的制备 | 第37页 |
| ·不同型号NC膜的选择结果 | 第37页 |
| ·T线及C线的优化结果 | 第37页 |
| ·试纸条的组装 | 第37-38页 |
| ·敏感性试验 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38-39页 |
| ·重复性试验 | 第39页 |
| ·稳定性试验 | 第39页 |
| ·试纸条的初步应用 | 第39-41页 |
| 讨论 | 第41-45页 |
| 1. 抗原 | 第41页 |
| 2. 细胞融合及筛选 | 第41-42页 |
| 3. 单克隆抗体的纯化 | 第42-43页 |
| 4. 胶体金的制备 | 第43-44页 |
| 5. 胶体金诊断试纸条的初步应用 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54页 |
