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苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1518插入突变体库的构建及芽胞萌发相关基因的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-28页
   ·苏云金芽胞杆菌简介第10页
   ·芽胞结构及芽胞形成第10-12页
   ·芽胞萌发的研究进展第12-22页
     ·芽胞萌发过程的事件第12-13页
     ·促进芽胞萌发的萌发剂第13-14页
     ·芽胞萌发的主要元件第14-18页
     ·芽胞萌发受体的定位第18-19页
     ·芽胞萌发的途径的研究第19-22页
   ·转座子插入突变第22-26页
     ·转座子的介绍第22-24页
     ·转座子插入突变技术第24-26页
   ·本研究目的和意义第26-28页
2 材料与方法第28-36页
   ·试剂和仪器第28-29页
     ·试剂第28页
     ·仪器第28-29页
   ·菌株和材料第29-31页
     ·菌株和质粒第29-30页
     ·本研究所用培养基配方第30页
     ·细菌质粒的制备和 DNA操作第30-31页
   ·转化第31-33页
     ·大肠杆菌的电转化第31-32页
     ·苏云金芽胞杆菌的电转化第32-33页
   ·相差显微镜观察第33页
   ·吸光值检测第33页
   ·苏云金芽胞杆菌突变体库的构建第33-35页
     ·突变体的构建流程第33-34页
     ·突变体库 PCR检测用引物第34页
     ·突变体库的保存第34-35页
   ·芽胞萌发实验第35-36页
     ·芽胞前处理第35页
     ·芽胞萌发实验(筛选萌发受体被突变突变子)第35-36页
3 结果与分析第36-49页
   ·YBT-1518菌株突变体库的构建与鉴定第36-38页
     ·突变体库的构建第36-37页
     ·突变子的抗性筛选与鉴定第37页
     ·小结第37-38页
   ·芽胞萌发缺陷突变株的筛选与鉴定第38-42页
     ·突变株的初步筛选第38页
     ·突变株的复筛第38-40页
     ·突变株的PCR鉴定第40页
     ·突变株MA1在其他萌发剂诱导下的萌发情况第40-42页
     ·芽胞的抗逆性实验第42页
     ·小结第42页
   ·MA1的Mini-Tn10插入突变基因的克隆与分析第42-49页
     ·MA1插入突变侧翼序列的获得第42-44页
     ·MA1插入突变基因的克隆第44-45页
     ·MA1插入位点侧翼序列的分析第45-46页
     ·GntP蛋白生物学功能的预测第46-47页
     ·芽胞萌发表型的回补实验第47-48页
     ·小结第48-49页
4 讨论第49-53页
   ·转座子及转座插入突变第49-50页
   ·突变位点的确定和目的基因的克隆第50页
   ·芽胞萌发缺陷突变菌株的筛选第50-51页
   ·Gntp蛋白的功能第51-53页
5 总结第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
附录一 本研究所用工具载体的物理图谱第62-63页
附录二 发表文章第63页

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