| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-28页 |
| 1 紫花苜蓿基因工程研究进展 | 第10-17页 |
| ·常用的植物遗传转化技术 | 第10-13页 |
| ·苜蓿组织培养研究进展 | 第13-14页 |
| ·苜蓿基因工程研究进展 | 第14-17页 |
| 2 硫在反刍动物营养中的作用 | 第17-20页 |
| ·反刍动物中硫的生理功能 | 第18-19页 |
| ·反刍动物利用硫的途径 | 第19-20页 |
| 3 富硫蛋白及基因研究进展 | 第20-23页 |
| ·醇溶蛋白(prolamin) | 第20-21页 |
| ·清蛋白（Albumin） | 第21-22页 |
| ·植物凝集素（Phytoagglutinin） | 第22页 |
| ·硫堇（Thionin） | 第22-23页 |
| 4 蛋白质分选与内质网驻留蛋白信号肽 | 第23-27页 |
| ·信号假说（signal hypothesis） | 第23-24页 |
| ·典型的蛋白质分选信号 | 第24页 |
| ·KDEL 信号肽作用机理 | 第24-27页 |
| 5 研究意义 | 第27-28页 |
| 第一章 10KD 玉米醇溶蛋白基因的克隆与植物表达载体构建 | 第28-42页 |
| 1 材料与方法 | 第28-35页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·玉米基因组DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·PCR 扩增10KD 玉米醇溶蛋白基因序列 | 第30-31页 |
| ·PCR 反应产物的回收 | 第31页 |
| ·目的基因的亚克隆 | 第31-33页 |
| ·重组子的筛选 | 第33-34页 |
| ·序列测定及分析 | 第34页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·玉米基因组DNA 提取 | 第35页 |
| ·10KD 玉米醇溶蛋白基因PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·碱裂解法小量制备重组子质粒 | 第36页 |
| ·重组子的双酶切鉴定和PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·序列测定及预测的氨基酸序列 | 第37-38页 |
| ·序列同源性分析 | 第38-40页 |
| ·质粒CA-zei1110 的双酶切鉴定 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 紫花苜蓿组织再生体系的建立 | 第42-48页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·实验材料与试剂 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·种子消毒方式及时间的选择 | 第42-43页 |
| ·无菌苗的获得 | 第43页 |
| ·培养环境 | 第43页 |
| ·愈伤组织诱导培养基的选择 | 第43页 |
| ·外植体的选择 | 第43-44页 |
| ·分化培养 | 第44页 |
| ·继代培养 | 第44页 |
| ·生根培养 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-46页 |
| ·种子消毒方式及时间的选择 | 第44-45页 |
| ·直接出芽培养基的选择 | 第45-46页 |
| ·外植体类型对组织培养的影响 | 第46页 |
| ·丛生芽生根 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| ·不同品种对组织再生的影响 | 第46-47页 |
| ·植物组织培养中褐变的发生及防止途径 | 第47-48页 |
| 第三章 紫花苜蓿的转化及分子生物学检测 | 第48-61页 |
| 1 材料与方法 | 第48-55页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-55页 |
| ·农杆菌的转化及鉴定 | 第49-50页 |
| ·抗生素抑菌浓度的确定 | 第50-51页 |
| ·Carb 对外植体分化的影响 | 第51页 |
| ·Hyg 选择压力的确定 | 第51-52页 |
| ·紫花苜蓿的转化 | 第52-53页 |
| ·再生植株的分子检测 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·碱裂解法提取农杆菌转化子质粒DNA | 第55页 |
| ·农杆菌的PCR 鉴定 | 第55-56页 |
| ·Carb 和Cef 抑菌浓度的确定 | 第56页 |
| ·Carb 对外植体分化的影响 | 第56-57页 |
| ·Hyg 选择压力的确定 | 第57页 |
| ·再生植株的获得 | 第57-58页 |
| ·再生植株的PCR 检测结果 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| ·基因型对转化效率的影响 | 第58-59页 |
| ·农杆菌菌株对转化的影响 | 第59页 |
| ·共培养对转化的影响 | 第59页 |
| ·选择方法和选择时间对转化的影响 | 第59-60页 |
| ·转基因植株中选择标记的去除 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 主要英文缩略词表 | 第70-71页 |
| 在读期间发表论文清单 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |