| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-27页 |
| 第二部分 研究报告 | 第27-62页 |
| 第一章 山羊痘病毒温度敏感弱毒株部分 HindⅢ片段的克隆和鉴定 | 第27-41页 |
| 1. 材料和方法 | 第27-35页 |
| ·羊痘毒株 | 第27页 |
| ·菌株和载体 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·仪器和设备 | 第27-28页 |
| ·羊痘病毒株适应细胞传代 | 第28页 |
| ·病毒的提纯 | 第28页 |
| ·病毒基因组DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·羊痘病毒DNA 片段的克隆和鉴定 | 第29-32页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第32-35页 |
| 2. 结果 | 第35-39页 |
| ·羊痘病毒感染BHK-21 细胞后的病变图 | 第35页 |
| ·提纯后羊痘病毒的电镜照片 | 第35-36页 |
| ·病毒基因组的提取和鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-39页 |
| 3. 讨论 | 第39-41页 |
| ·羊痘病毒非必需区的筛选策略 | 第39页 |
| ·羊痘病毒HindⅢ克隆片段的分析 | 第39-40页 |
| ·羊痘病毒基因结构特点 | 第40-41页 |
| 第二章 非必需片段的筛选 | 第41-56页 |
| 1 材料和方法 | 第41-49页 |
| ·毒株和细胞 | 第41页 |
| ·菌株和载体 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器和设备 | 第42页 |
| ·P_(11)-P_(7.5)-LacZ基因框的分离 | 第42-43页 |
| ·P_(11)-P_(7.5)-LacZ基因框的补平 | 第43页 |
| ·含有羊痘病毒HindⅢ片段的重组质粒的酶切与去磷酸化 | 第43-44页 |
| ·连接与转化 | 第44-45页 |
| ·重组载体质粒的提取与鉴定 | 第45-49页 |
| 2 非必需片段的筛选 | 第49-51页 |
| ·质粒的大量提取与纯化 | 第49页 |
| ·CPV 感染 BHK-21 细胞 | 第49-50页 |
| ·转染 | 第50页 |
| ·重组病毒的筛选和纯化 | 第50页 |
| ·复制非必需区的遗传稳定性试验 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-54页 |
| ·P_(11)-P_(7.5)-LacZ 基因框的获得 | 第51-52页 |
| ·含有 P_(11)-P_(7.5)-LacZ 基因框的重组载体质粒的获得 | 第52页 |
| ·接种羊痘病毒后病变的 BHK-21 细胞 | 第52-53页 |
| ·CPV 复制非必需片段的筛选 | 第53-54页 |
| ·复制非必需区的遗传稳定性试验 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| ·转染和病毒的筛选 | 第54-55页 |
| ·插入位点的探讨 | 第55页 |
| ·连接效果的讨论 | 第55页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附图 | 第62-68页 |
| 导师简介 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
