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扩展青霉PF898碱性脂肪酶基因的克隆与表达

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
第一部分 文献综述第10-49页
 微生物脂肪酶研究进展第10-49页
  1 微生物脂肪酶的水解特异性第11-13页
  2 微生物脂肪酶的纯化第13-14页
  3 微生物脂肪酶基因的克隆及序列分析第14-17页
  4 微生物脂肪酶基因表达与调控第17-24页
  5 微生物脂肪酶的蛋白质一级结构第24-30页
  6 微生物脂肪酶的分泌和折叠第30-32页
  7 微生物脂肪酶的空间结构及酶作用机理第32-39页
  8 微生物脂肪酶的研究展望第39-49页
第二部分 前言第49-51页
第三部分 材料与方法第51-64页
 1 材料第51-53页
 2 一般方法第53-59页
 3 具体方法第59-64页
第四部分 结果与分析第64-105页
 1 扩展青霉PF898碱性脂肪酶的纯化及N-端氨基酸序列分析第64-73页
  1.1 扩展青霉PF898碱性脂肪酶(PEL)的纯化第64-70页
  1.2 纯化蛋白的分子量第70页
  1.3 N-端氨基酸序列分析第70-73页
 2 扩展青霉PF898碱性脂肪酶cDNA克隆及序列分析第73-89页
  2.1 菌丝体总RNA的提取第73页
  2.2 RT-PCR第73-74页
  2.3 5'RACE第74-76页
  2.4 PEL的cDNA及氨基酸序列分析第76-86页
  2.5 PEL高级结构计算机模建第86-89页
 3 扩展青霉PF898碱性脂肪酶GENOMIC DNA序列分析第89-95页
  3.1 菌丝体DNA的抽提第89-90页
  3.2 PCR扩增第90页
  3.3 PEL的DNA序列分析第90-95页
 4 扩展青霉PF898碱性脂肪酶基因在大肠杆菌中的表达第95-100页
  4.1 重组表达质粒的构建第95-96页
  4.2 在大肠杆菌中的诱导表达第96-99页
  4.3 表达产物的活性检测第99-100页
 5 扩展青霉PF898碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达第100-105页
  5.1 重组表达质粒的构建第100-101页
  5.2 阳性克隆的筛选及诱导表达第101-102页
  5.3 表达蛋白的活性检测第102-105页
第五部分 讨论与结论第105-110页
 1 讨论第105-108页
 2 结论第108-110页
参考文献第110-120页
附录一 GENBANK收录的扩展青霉PF898碱性脂肪酶cDNA序列第120-122页
附录二 GENBANK收录的扩展青霉PF898碱性脂肪酶基因组DNA序列第122-125页
附录三 在学期间发表和完成的论文第125-127页
致谢第127-128页

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