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水稻脂肪氧化酶RNA干扰载体的构建及转化水稻进行耐储藏的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
1 绪论第12-32页
   ·植物脂肪氧化酶研究进展第12-21页
     ·脂肪氧化酶及其与谷物陈化的关系第12-13页
     ·脂肪氧化酶在植物中的细胞定位和活性第13页
     ·LOX 以及LOX1、2、3 主要存在的部位和表达的时间第13-14页
     ·脂肪氧化酶的氧化途径第14页
     ·脂肪氧化酶的测定方法第14-15页
     ·脂肪氧化酶的生化特性第15-16页
     ·脂肪氧化酶的生理学功能第16-18页
     ·脂肪氧化酶基因及其表达第18-19页
     ·脂肪氧化酶与稻谷耐贮特性第19-21页
     ·今后研究重点第21页
   ·水稻脂肪氧化酶第21-23页
     ·水稻脂肪氧化酶缺失的效果第21页
     ·水稻种胚LOX 与叶片LOX 同工酶的差异第21-22页
     ·国内研究进展第22-23页
   ·RNA 干涉研究进展第23-28页
     ·RNA 干涉的概况第23-24页
     ·RNA 干涉的发现第24页
     ·RNA 干涉的机制第24-25页
     ·RNA 干涉的生物学意义第25-26页
     ·RNA 干涉的特点第26-27页
     ·RNA 干涉在基因功能研究中的应用第27-28页
   ·本论文的研究目的和研究内容第28-30页
     ·研究目的和意义第28-29页
     ·本论文的研究内容第29页
     ·本论文的研究技术路线第29-30页
   ·本论文研究的创新点第30-32页
2 构建 RNAi 载体各个片段的克隆及玉米泛素启动子功能的瞬时检测第32-46页
   ·试验材料第32-33页
     ·试验植物第32页
     ·主要实验试剂第32-33页
     ·主要仪器设备第33页
   ·实验方法第33-41页
     ·水稻、玉米基因组DNA 的提取第33页
     ·水稻新生苗总RNA 的提取第33-34页
     ·农杆菌中PBI121 和pCAMBIA-1301 质粒的提取第34页
     ·构建p13UL、p13SL RNAi 载体各个片段的克隆及序列分析第34-38页
     ·玉米泛素启动子功能的瞬时检测第38-41页
   ·结果和分析第41-44页
     ·水稻、玉米基因组DNA 的提取第41页
     ·水稻新生苗总RNA 的提取第41-42页
     ·构建p13UL、p13SL RNAi 载体各个片段的克隆及序列分析第42-43页
     ·玉米泛素启动子功能的瞬时检测第43-44页
   ·讨论第44-46页
     ·构建p13UL、p13SL RNAi 载体各个片段的克隆第44-45页
     ·玉米泛素启动子功能的瞬时检测第45-46页
3 植物 RNAi 表达载体 p13UL 和 p13SL 的构建第46-55页
   ·试验材料第46页
   ·实验方法第46-51页
     ·植物RNAi 表达载体p13UL 的构建第47-48页
     ·植物RNAi 表达载体p13SL 的构建第48-51页
   ·结果和分析第51-53页
     ·植物RNAi 表达载体p13UL 的构建第51-52页
     ·植物RNAi 表达载体p13SL 的构建第52-53页
   ·讨论第53-55页
4 根癌农杆菌介导 p13UL、p13SL 表达载体转化水稻第55-64页
   ·试验材料第55-56页
     ·菌种和质粒第55页
     ·生物材料第55页
     ·培养基第55-56页
   ·试验方法第56-57页
     ·植物表达载体转化农杆菌第56页
     ·根癌农杆菌转化水稻愈伤步骤同2.2.5第56页
     ·水稻胚性愈伤组织的诱导、根癌农杆菌的培养、洗除农杆菌步骤同2.2.5第56页
     ·抗性愈伤的筛选第56页
     ·抗性愈伤的分化培养与再生第56-57页
     ·转基因植物的PCR 及半定量RT-PCR 鉴定第57页
   ·结果和分析第57-63页
     ·重组农杆菌的菌落PCR 鉴定第57-58页
     ·抗性愈伤的筛选第58页
     ·抗性愈伤的分化培养与再生第58-59页
     ·转基因植物的鉴定第59-63页
   ·讨论第63-64页
5 结论和后续工作建议第64-65页
   ·主要结论第64页
   ·后续研究工作的展望第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-72页
附录第72-74页
 A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录第72页
 B. 作者在攻读学位期间在 Genbank 中登陆的序列号第72-74页

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