| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-23页 |
| ·无融合生殖现象 | 第10-11页 |
| ·甜菜M14品系无融合生殖材料及研究进展 | 第11-13页 |
| ·甜菜M14品系特异表达基因M14-263 | 第13页 |
| ·小GTP结合蛋白 | 第13-16页 |
| ·小GTP结合蛋白的种类及功能 | 第13-14页 |
| ·小GTP结合蛋白的结构及其调节方式 | 第14-15页 |
| ·Rab蛋白 | 第15-16页 |
| ·基因工程中的农杆菌转化系统概述 | 第16-19页 |
| ·农杆菌转化系统的原理 | 第17-18页 |
| ·植物基因工程中的表达载体pBI121 | 第18页 |
| ·农杆菌转化系统的优点及局限性 | 第18-19页 |
| ·蛋白质双向电泳技术 | 第19-21页 |
| ·本实验的内容及目的 | 第21页 |
| ·本实验的技术路线 | 第21-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第23页 |
| ·各种试剂及试剂盒 | 第23页 |
| ·实验所需常用溶液、试剂及培养基的配制 | 第23-24页 |
| ·实验所需引物及M14-263基因cDNA全长序列 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-40页 |
| ·甜菜M14品系特异表达基因M14-263 cDNA全长的获得 | 第25-27页 |
| ·植物表达载体pBI-M14-263的构建 | 第27-30页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α及阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第30-31页 |
| ·植物表达载体pBI-M14-263导入根癌农杆菌 | 第31-32页 |
| ·根癌农杆菌介导的模式植物的遗传转化 | 第32-33页 |
| ·转基因再生植株的分子生物学检测 | 第33-37页 |
| ·转基因再生植株的组织化学检测 | 第37页 |
| ·转基因再生植株的形态学观察及表型分析 | 第37页 |
| ·转M14-263基因烟草与未转基因烟草植株的蛋白质双向电泳 | 第37-40页 |
| 第3章 结果与分析 | 第40-67页 |
| ·甜菜M14品系特异表达基因M14-263 cDNA全长的获得 | 第40-42页 |
| ·甜菜M14品系花器总RNA的提取 | 第40页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第40-41页 |
| ·M14-263基因cDNA全长的扩增 | 第41页 |
| ·M14-263基因在野生型烟草及拟南芥中的扩增 | 第41-42页 |
| ·植物表达载体pBI-M14-263的构建 | 第42-44页 |
| ·质粒载体pBI121的制备 | 第42-43页 |
| ·质粒载体pBI121的酶切反应 | 第43页 |
| ·M14-263基因的酶切反应 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌DH5α阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第44-46页 |
| ·植物表达载体pBI-M14-263导入根癌农杆菌 | 第46-47页 |
| ·电击法转化根癌农杆菌EHA105 | 第46页 |
| ·农杆菌阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
| ·根癌农杆菌介导的模式植物的遗传转化 | 第47-50页 |
| ·烟草遗传转化体系的优化 | 第47-48页 |
| ·叶盘法转化烟草植株 | 第48-49页 |
| ·花头浸泡法转化拟南芥 | 第49-50页 |
| ·烟草转基因再生植株的分子生物学检测 | 第50-53页 |
| ·M14-263基因在转基因烟草基因组DNA中的PCR检测 | 第50-51页 |
| ·Southern印迹 | 第51页 |
| ·M14-263基因在转基因烟草花、茎、叶中的RT-PCR检测 | 第51-52页 |
| ·Northern印迹 | 第52-53页 |
| ·烟草转基因再生植株的组织化学检测 | 第53-55页 |
| ·拟南芥转基因T_0代植株的分子生物学检测 | 第55-57页 |
| ·拟南芥转基因植株T_0代转基因植株的获得 | 第55-56页 |
| ·T_0代拟南芥转基因植株基因组DNA中的PCR检测 | 第56页 |
| ·T_0代拟南芥的RT-PCR检测 | 第56-57页 |
| ·转基因再生植株的形态学观察及表型分析 | 第57-63页 |
| ·T_0代烟草转基因植株 | 第57-63页 |
| ·T_0代拟南芥转基因植株 | 第63页 |
| ·转M14-263基因烟草与未转基因烟草叶片的蛋白质双向电泳 | 第63-67页 |
| 第4章 讨论 | 第67-73页 |
| ·M14-263基因在转基因植株体内的作用 | 第67-69页 |
| ·M14-263基因对转基因植株株型的影响 | 第67-68页 |
| ·M14-263基因对转基因植株花序的影响 | 第68-69页 |
| ·M14-263基因对转基因植株果实的影响 | 第69页 |
| ·叶盘法和花头浸泡法转化效果的比较 | 第69-70页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达情况及稳定性 | 第70页 |
| ·转M14-263基因烟草与未转基因烟草中差异表达蛋白的分析 | 第70-71页 |
| ·下一步实验设想 | 第71-73页 |
| 第5章 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 附录 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
