| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| 1 昆虫中的转座子 | 第13-21页 |
| ·转座子的分类及其在昆虫中的分布 | 第13-19页 |
| ·发现和研究昆虫转座子的方法 | 第19页 |
| ·昆虫转座子的进化 | 第19-21页 |
| ·昆虫转座子的应用 | 第21页 |
| 2 转基因昆虫研究 | 第21-29页 |
| ·转基因昆虫研究进展 | 第21-22页 |
| ·用于转基因昆虫的各类转座子 | 第22-29页 |
| ·P因子 | 第24页 |
| ·hobo,(hAT)转座子家族 | 第24页 |
| ·Minos转座子 | 第24页 |
| ·Mosl(mariner)转座子 | 第24-26页 |
| ·piggyBac转座子 | 第26-29页 |
| ·piggyBac转座子的发现及结构特征 | 第26页 |
| ·piggyBac转座子的分布 | 第26-28页 |
| ·piggyBac转座子的特点 | 第28-29页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 第二章 鳞翅目昆虫中piggyBac类似因子分布调查 | 第31-44页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·供试昆虫 | 第31页 |
| ·主要药剂 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·PCR反应体系和反应条件 | 第32-33页 |
| ·PCR产物回收与纯化 | 第33页 |
| ·感受态大肠杆菌细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·连接反应及连接产物的转化 | 第34-35页 |
| ·单克隆的挑选及扩大培养 | 第35页 |
| ·转化产物检测 | 第35-36页 |
| ·序列测定和序列分析 | 第36页 |
| ·Southern点杂交 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·鳞翅目昆虫中piggyBac因子的分布 | 第37-40页 |
| ·五个夜蛾科piggyBac类似因子片段 | 第40-42页 |
| ·五个夜蛾科piggyBac类似因子片段同源性分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 银锭夜蛾、小地老虎、银纹夜蛾中piggyBac类似因子全序列克隆 | 第44-63页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| ·供试昆虫 | 第45页 |
| ·主要药剂 | 第45页 |
| ·基因组DNA提取 | 第45页 |
| ·环状DNA模板的制备 | 第45-46页 |
| ·PCR引物设计 | 第46-47页 |
| ·PCR反应体系 | 第47页 |
| ·PCR克隆策略 | 第47-48页 |
| ·PCR产物回收与纯化 | 第48页 |
| ·感受态大肠杆菌细胞的制备 | 第48页 |
| ·连接反应及连接产物的转化 | 第48页 |
| ·单克隆的挑选及扩大培养 | 第48页 |
| ·转化产物检测 | 第48页 |
| ·序列测定与序列 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-61页 |
| ·基因组Walking结果分析 | 第48-50页 |
| ·银锭夜蛾McrPLE因子 | 第50-52页 |
| ·小地老虎AyPLE因子 | 第52-56页 |
| ·银纹夜蛾AaPLE因子 | 第56-57页 |
| ·三个piggyBac类似因子的序列分析 | 第57-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 piggyBac转座子基因的系统进化分析 | 第63-67页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·piggyBac因子的氨基酸序列 | 第63-65页 |
| ·piggyBac转座子系统进化树的构建 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 三个piggyBac类似因子转座活性分析 | 第67-79页 |
| 1 材料与方法 | 第67-71页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·实验细胞 | 第67-68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·载体构建和制备 | 第68-69页 |
| ·质粒DNA转染 | 第69页 |
| ·果蝇S2细胞中质粒DNA的提取 | 第69页 |
| ·电转化感受态细胞制备 | 第69-70页 |
| ·电击转化 | 第70页 |
| ·剪切试验 | 第70-71页 |
| ·转座试验 | 第71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-78页 |
| ·构建的Helper载体 | 第71页 |
| ·构建的Donor载体 | 第71-73页 |
| ·McrPLE因子的活性检测结果 | 第73-76页 |
| ·AyPLE1.1和AaPLE1.1活性检测实验结果 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 第六章 piggyBac因子相互作用初探 | 第79-87页 |
| 1 材料与方法 | 第79-81页 |
| ·实验细胞 | 第79-80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·载体的构建和制备 | 第80页 |
| ·剪切实验 | 第80页 |
| ·质粒DNA转染 | 第80页 |
| ·果蝇S2细胞中抽提质粒DNA | 第80页 |
| ·电转化感受态细胞制备 | 第80-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-84页 |
| ·构建的pHa[KOα]Donor载体 | 第81页 |
| ·亚末端反向重复序列在piggyBac转座子活动中的作用 | 第81-82页 |
| ·piggyBac转座子的相互作用结果 | 第82-83页 |
| ·果蝇S2细胞因子与piggyBac家族转座子的互作 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-104页 |
| 附录:攻读学位期间发表的学术论文 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
