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三羟异黄酮与RNA干扰survivin基因联合应用于DU-145前列腺癌细胞的实验研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
致谢第7-12页
第一章 绪论第12-25页
   ·三羟异黄酮和肿瘤第12-17页
     ·简介第12页
     ·genistein对癌症抑制机制的研究进展第12-17页
     ·小结第17页
   ·survivin和肿瘤第17-23页
     ·survivin简介第17页
     ·survivin的结构第17-18页
     ·survivin在亚细胞中的分布第18-19页
     ·survivin的生物功能第19-21页
     ·RNAi技术抑制survivin基因表达在肿瘤治疗上的应用第21-22页
     ·结论和展望第22-23页
   ·研究背景第23-25页
第二章 genistein对DU-145细胞增殖和凋亡的影响第25-32页
   ·材料第25-26页
     ·细胞株第25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要溶液配制第25-26页
   ·方法第26-27页
     ·细胞培养第26页
     ·药物配置第26页
     ·实验分组第26页
     ·MTT法测定不同浓度genistein对DU-145细胞增殖的影响第26-27页
     ·细胞计数法测定genistein对DU-145细胞增殖的影响第27页
     ·荧光显微镜观察DU-145细胞凋亡情况第27页
   ·结果第27-30页
     ·MTT法测定不同浓度genistein对DU-145细胞增殖的影响第27-28页
     ·细胞计数法测定genistein对DU-145细胞增殖的影响第28页
     ·genistein对DU-145细胞凋亡的影响第28-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 pU6+27-survivin质粒载体的构建与鉴定第32-45页
   ·材料第32-35页
     ·质粒第32-33页
     ·菌种第33页
     ·外源DNA第33页
     ·工具酶第33页
     ·主要仪器设备第33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要溶液配置第34-35页
   ·方法第35-41页
     ·外源DNA的合成第36页
     ·质粒载体pU6+27 DNA抽提、双酶切及与目的片段连接第36-39页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第39-40页
     ·pU6+27-survivin质粒载体的酶切检测和测序第40-41页
   ·结果第41-42页
     ·重组质粒的双酶切鉴定结果第41页
     ·重组质粒的单酶切鉴定结果第41-42页
     ·重组质粒的测序结果分析第42页
   ·讨论第42-45页
第四章 genistein和RNA干扰联合使用对于DU-145细胞增殖和周期的影响第45-57页
   ·材料第45-46页
     ·质粒第45页
     ·细胞株第45页
     ·主要仪器设备第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·主要溶液的配制第46页
   ·方法第46-50页
     ·细胞转染第46-47页
     ·RT-PCR检测survivin基因mRNA表达第47-49页
     ·MTT法测定genistein和RNAi对DU-145细胞增殖的影响第49页
     ·FACS检测genistein和RNAi对DU-145细胞凋亡的影响第49-50页
   ·结果第50-55页
     ·RT-PCR检测survivin基因mRNA表达第50页
     ·MTT法测定genistein和RNAi对DU-145细胞增殖的影响第50-51页
     ·FACS检测genistein和RNAi对DU-145细胞凋亡的影响第51-55页
   ·讨论第55-57页
第五章 总结与展望第57-59页
参考文献第59-66页

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