| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-39页 |
| 1 稻瘟病菌侵染循环 | 第14-16页 |
| 2 稻瘟病菌功能基因的研究 | 第16-31页 |
| ·稻瘟病菌分生孢子形态与产孢相关基因 | 第17-18页 |
| ·附着胞发育相关基因 | 第18-20页 |
| ·识别物体表面特性的基因 | 第18-19页 |
| ·黑色素合成相关基因 | 第19-20页 |
| ·附着胞形成相关基因 | 第20页 |
| ·稻瘟病菌附着胞形成发育信号传导途径 | 第20-26页 |
| ·cAMP信号传导途径 | 第21-22页 |
| ·MAPK信号传导途径 | 第22-24页 |
| ·Ca~(2+)信号传导途径 | 第24-26页 |
| ·稻瘟病菌附着胞的穿透与扩展以及病斑形成 | 第26-28页 |
| ·附着胞的穿透 | 第26-27页 |
| ·侵入后生长及病斑形成 | 第27-28页 |
| ·稻瘟病菌无毒基因 | 第28-31页 |
| 3 稻瘟病菌功能基因研究策略 | 第31-35页 |
| ·同源基因克隆及候选基因敲除法 | 第31页 |
| ·图位克隆法 | 第31-32页 |
| ·cDNA差异显示法以及cDNA微阵列 | 第32页 |
| ·突变体研究途径 | 第32-35页 |
| ·物理诱变 | 第32-33页 |
| ·化学诱变 | 第33页 |
| ·外源DNA插入突变 | 第33-35页 |
| 4 真菌具锌指结构类转录因子 | 第35-36页 |
| 5 NADK激酶 | 第36-39页 |
| 第二章 材料和方法 | 第39-58页 |
| 1 试验使用的菌株、质粒、试剂和培养基等材料 | 第39-40页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·质粒载体 | 第39页 |
| ·供试植物 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39-40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| 2 稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| 3 DNA琼脂糖电泳 | 第41页 |
| 4 稻瘟病菌总RNA的提取与分析 | 第41-42页 |
| 5 DNA片段的PCR扩增 | 第42-45页 |
| ·普通PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·TAIL-PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR | 第44-45页 |
| 6 PCR产物的克隆 | 第45页 |
| 7 Escherichia.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| 8 感受态细胞的转化 | 第46页 |
| 9 质粒DNA的提取 | 第46页 |
| 10 质粒酶切与连接 | 第46-47页 |
| 11 DNA序列测序 | 第47页 |
| 12 DNA和蛋白序列分析 | 第47页 |
| 13 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第47-48页 |
| 14 稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证 | 第48-49页 |
| 15 稻瘟病菌基因敲除 | 第49页 |
| 16 稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交 | 第49-55页 |
| ·探针的准备 | 第49-52页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的消化及电泳 | 第52-54页 |
| ·一种或几种限制性内切酶消化适当数量的DNA | 第52页 |
| ·DNA变性 | 第52-53页 |
| ·DNA转膜 | 第53-54页 |
| ·Southern杂交 | 第54-55页 |
| ·免疫显色 | 第55页 |
| 17 稻瘟病菌有性杂交与后代分离 | 第55页 |
| 18 稻瘟病菌的表型观察 | 第55-57页 |
| ·生长速率测定与菌落颜色 | 第55-56页 |
| ·产孢量测定 | 第56页 |
| ·孢子萌发率的测定 | 第56页 |
| ·附着胞形成率及洋葱表皮侵入实验 | 第56页 |
| ·对植物致病性的测定 | 第56-57页 |
| ·水稻育苗及接种方法 | 第56页 |
| ·调查与记载 | 第56-57页 |
| ·大麦叶片离体接种 | 第57页 |
| 19 稻瘟病菌ATP-NADK激酶活性测定 | 第57-58页 |
| 第三章 稻瘟病菌产孢相关基因功能分析 | 第58-83页 |
| 1 T-DNA插入产孢缺陷突变体表型分析 | 第58-63页 |
| ·产孢缺陷突变体生长发育分析 | 第58-61页 |
| ·产孢缺陷突变体侵入情况与致病性分析 | 第61-62页 |
| ·产孢缺陷突变体育性与后代群体性状分析 | 第62-63页 |
| 2 T16B-2分子检测 | 第63-65页 |
| ·T16B-2中T-DNA拷贝数 | 第63-64页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的获得 | 第64-65页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列同源性分析 | 第65页 |
| 3 ConLW生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 4 ConLW基因敲除与功能互补 | 第66-78页 |
| ·基因敲除载体构建及敲除转化子筛选 | 第66-69页 |
| ·功能互补载体的构建 | 第69页 |
| ·T-DNA插入突变体与基因敲除突变体的功能互补 | 第69-70页 |
| ·敲除突变体5′端缺失突变 | 第70页 |
| ·各转化子性状分析 | 第70-77页 |
| ·生长发育 | 第70-74页 |
| ·侵入与致病性 | 第74-77页 |
| ·RT-PCR | 第77-78页 |
| 5 讨论 | 第78-82页 |
| ·T-DNA突变体与基因敲除突变体的性状差异 | 第79页 |
| ·不同版本数据库中基因结构差异 | 第79-80页 |
| ·ConLW功能研究 | 第80-81页 |
| ·Zn(Ⅱ)2Cys6蛋白结构域转录活性 | 第81-82页 |
| 6 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 稻瘟病菌与Pib致病相关基因的功能研究 | 第83-97页 |
| 1 T-DNA致病性增强突变体的分析 | 第83-84页 |
| 2 PthLW生物信息学分析 | 第84页 |
| 3 PthLW基因敲除与功能互补 | 第84-91页 |
| ·PthLW基因敲除 | 第84-86页 |
| ·PthLW基因功能互补 | 第86-87页 |
| ·基因敲除与功能互补转化子致病性分析 | 第87-89页 |
| ·ATP-NADK激酶检测 | 第89-91页 |
| 4 讨论 | 第91-95页 |
| ·T-DNA突变体与敲除突变体致病性状差异 | 第91-92页 |
| ·无毒基因的确认 | 第92-93页 |
| ·丝状真菌ATP-NADK | 第93-95页 |
| 5 小结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-113页 |
| 附录 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |