| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1.前言 | 第11-21页 |
| ·昆虫抗菌肽的分子结构及种类 | 第12-14页 |
| ·天蚕素类 | 第12页 |
| ·昆虫防御素 | 第12-13页 |
| ·富含脯氨酸的抗菌肽 | 第13页 |
| ·富含甘氨酸的抗菌肽 | 第13页 |
| ·抗真菌肽 | 第13-14页 |
| ·昆虫抗菌肽的作用及机理 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽的抗菌作用及其机理 | 第14页 |
| ·抗菌肽的抗病毒作用及其机理 | 第14页 |
| ·抗菌肽对某些原生动物的作用及其机理 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽对肿瘤细胞作用及其机理 | 第15页 |
| ·抗菌肽其他作用及其机理 | 第15页 |
| ·昆虫抗菌肽的应用前景 | 第15-16页 |
| ·医药领域 | 第15-16页 |
| ·农业领域 | 第16页 |
| ·食品工业和化妆品领域 | 第16页 |
| ·昆虫抗菌肽的分子生物学研究 | 第16-18页 |
| ·昆虫抗菌肽基因的分子组成 | 第16-17页 |
| ·昆虫抗菌肽基因的克隆和表达系统的研究 | 第17页 |
| ·抗菌肽的转基因研究 | 第17-18页 |
| ·RACE技术简介 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2.实验材料 | 第21-25页 |
| ·供试细胞系、菌株及质粒 | 第21页 |
| ·昆虫细胞培养基及细菌培养基 | 第21-22页 |
| ·昆虫细胞培养基 | 第21-22页 |
| ·细菌培养基 | 第22页 |
| ·实验所用试剂 | 第22-24页 |
| ·酶、常规试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·常用溶液及配制 | 第22-24页 |
| ·分子量标准 | 第24页 |
| ·实验仪器及设备 | 第24-25页 |
| 3.实验方法 | 第25-32页 |
| ·5B1细胞抗菌活性物质的提取及电泳分析 | 第25-27页 |
| ·细胞培养 | 第25页 |
| ·抗菌活性物质的诱导 | 第25-27页 |
| ·抗菌活性物质的转膜及N端序列测定 | 第27页 |
| ·PCR引物设计 | 第27页 |
| ·5B1细胞总RNA的抽提制备 | 第27-28页 |
| ·3,RACE | 第28-29页 |
| ·逆转录 | 第28-29页 |
| ·目标DNA链的扩增 | 第29页 |
| ·PCR产物的提纯及连接 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的回收 | 第29-30页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·E.coli DH5a感受态细胞的制备,转化及阳性克隆的鉴定 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30-31页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第31页 |
| ·DNA序列测定 | 第31页 |
| ·cDNA序列生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 4.结果及分析 | 第32-42页 |
| ·抗菌活性物质抑菌活性鉴定 | 第32页 |
| ·抗菌活性物质Trcine SDS-PAGE电泳结果 | 第32-33页 |
| ·蛋白质N端序列及引物设计 | 第33-34页 |
| ·RNA提取及质量评估 | 第34页 |
| ·3’-RACE结果 | 第34-35页 |
| ·重组克隆载体的鉴定——菌落PCR法 | 第35页 |
| ·重组克隆载体的序列测定 | 第35-36页 |
| ·HABP基因及其编码序列的生物信息学分析 | 第36-42页 |
| ·DNAman软件分析结果 | 第36页 |
| ·BLAST比对结果 | 第36-38页 |
| ·利用SignalP 3.0 Server进行信号肽预测 | 第38-39页 |
| ·利用Porter分析编码蛋白的二级结构 | 第39-40页 |
| ·利用interPro Scan对编码的蛋白进行综合分析结果 | 第40-42页 |
| 5.讨论 | 第42-47页 |
| ·离体细胞诱导抗菌肽的研究 | 第42-43页 |
| ·Tricine SDS-PAGE电泳方法分析诱导产物 | 第43页 |
| ·目的基因的克隆 | 第43-45页 |
| ·GSP的设计 | 第43页 |
| ·RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·所得序列的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| ·关于本实验后续工作的设想 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
