中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
引言 | 第16-18页 |
上篇 文献综述 | 第18-63页 |
第一章 植物病原卵菌分子遗传学研究进展 | 第18-42页 |
1 卵菌的分类地位 | 第19页 |
2 卵菌病害 | 第19-20页 |
3 植物病原卵菌的生活史 | 第20-21页 |
4 卵菌与植物的相互作用 | 第21-28页 |
·孢子囊的形成到游动孢子的游动 | 第21-22页 |
·游动孢子寻根策略 | 第22-24页 |
·游动孢子休止和定殖 | 第24-25页 |
·休止孢萌发、附着胞或类似附着胞结构的形成 | 第25-26页 |
·卵菌与植物的互作 | 第26-28页 |
5 生物防治 | 第28-29页 |
6 卵菌的遗传操作 | 第29-32页 |
·卵菌转化技术和基因沉默研究 | 第29-30页 |
·基因沉默机制 | 第30-31页 |
·TILLING技术 | 第31页 |
·蛋白质组研究 | 第31-32页 |
·噬菌体展示技术 | 第32页 |
参考文献 | 第32-42页 |
第二章 真核病原生物的侵染策略 | 第42-63页 |
1 Plasmodium falciparum侵染人体红血球 | 第43-45页 |
2 Phytophthora infestans侵染植物 | 第45-46页 |
3 真核病原生物的寄主定位信号 | 第46-48页 |
4 真核病原生物寄主定位功能域的保守性 | 第48-49页 |
5 寄主定位泌出蛋白组的比较 | 第49-53页 |
6 侵染机制上其他的相似性 | 第53-55页 |
·入侵和穿透寄主的机制 | 第53-54页 |
·病原物繁殖时抑制寄主的蛋白酶 | 第54-55页 |
7 真核病原生物的聚类关系 | 第55页 |
8 总结 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
下篇 研究内容 | 第63-173页 |
第一章 大豆疫霉原生质体制备及再生菌株生物学性状研究 | 第64-74页 |
1 材料与方法 | 第65-67页 |
·供试菌株和大豆品种 | 第65-66页 |
·原生质体制备 | 第66页 |
·原生质体和细胞核观察 | 第66-67页 |
·原生质体再生率测定 | 第67页 |
·原生质体再生菌株的生长速率和致病性测定 | 第67页 |
2 结果与分析 | 第67-70页 |
·原生质体制备条件的确定 | 第67-69页 |
·原生质体形成机制 | 第69页 |
·原生质体再生菌株的生物学性状 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
第二章 利用GFP研究大豆疫霉与大豆的互作 | 第74-90页 |
1 材料与方法 | 第76-79页 |
·供试菌株和大豆品种 | 第76-77页 |
·大豆疫霉转化载体 | 第77页 |
·大豆疫霉的转化 | 第77页 |
·GFP转化子的筛选确认和表达观察 | 第77-78页 |
·生物学测定 | 第78页 |
·转GFP菌株侵染大豆叶片、下胚轴、幼根的观察 | 第78-79页 |
2 结果与分析 | 第79-84页 |
·GFP转化大豆疫霉的结果 | 第79页 |
·GFP转化子的遗传稳定性分析 | 第79-82页 |
·GFP示踪大豆疫霉侵染过程 | 第82页 |
·亲和与非亲和互作芽管长度的比较 | 第82-84页 |
3 讨论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-90页 |
第三章 大豆疫霉早期侵染互作表型研究 | 第90-104页 |
1 材料与方法 | 第92-94页 |
·大豆疫霉菌株 | 第92页 |
·供试植物 | 第92页 |
·与植物互作的大豆疫霉菌丝观察 | 第92-93页 |
·植物叶片染色 | 第93页 |
·大豆疫霉附着胞的形成 | 第93页 |
·过氧化氢对游动孢子休止、萌发的影响 | 第93-94页 |
2 结果与分析 | 第94-101页 |
·与植物互作的大豆疫霉菌丝观察 | 第94-95页 |
·大豆疫霉附着胞的形成 | 第95-96页 |
·与大豆疫霉互作的寄主和非寄主植物反应表型 | 第96页 |
·过氧化氢对游动孢子行为的影响 | 第96-101页 |
3 讨论 | 第101页 |
参考文献 | 第101-104页 |
第四章 大豆与大豆疫霉互作相关的氧化压力反应 | 第104-126页 |
1 材料与方法 | 第106-109页 |
·供试菌株和大豆品种 | 第106页 |
·H_2O_2的原位检测及其动态变化 | 第106-107页 |
·过敏反应细胞死亡检测 | 第107页 |
·互作中大豆PRs基因的转录水平变化 | 第107-108页 |
·丙二醛含量动态变化 | 第108页 |
·抗坏血酸和谷胱甘肽含量的变化 | 第108-109页 |
·抗氧化系统酶活力测定 | 第109页 |
·外源施用还原剂对互作的影响 | 第109页 |
2 结果与分析 | 第109-120页 |
·大豆叶片中H_2O_2进发的组织定位和动态变化 | 第109-111页 |
·病原菌诱导植物细胞死亡检测 | 第111-113页 |
·大豆疫霉菌诱导大豆叶片防卫基因表达 | 第113-114页 |
·抗氧化系统在互作中的作用 | 第114-118页 |
·外源施用还原剂对互作的影响 | 第118-120页 |
3 讨论 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-126页 |
第五章 大豆疫霉侵染早期诱导表达基因的筛选 | 第126-146页 |
1 材料与方法 | 第128-132页 |
·供试菌株和大豆材料 | 第128-129页 |
·供试药剂和培养基 | 第129页 |
·大豆接种 | 第129-130页 |
·SSH差异筛选 | 第130页 |
·dot-blot assay | 第130页 |
·DNA序列分析 | 第130-131页 |
·virtual Northerns | 第131页 |
·反转录PCR(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR) | 第131-132页 |
2.结果与分析 | 第132-139页 |
·正向差减cDNA文库的建立 | 第132-133页 |
·dot blots分析 | 第133-135页 |
·DNA序列分析 | 第135-139页 |
·Virtual Northern分析 | 第139页 |
·RT-PCR分析 | 第139页 |
3 讨论 | 第139-142页 |
参考文献 | 第142-146页 |
第六章 大豆疫霉C_2H_2型锌指蛋白基因的克隆、表达分析及功能验证 | 第146-160页 |
1 材料与方法 | 第147-151页 |
·供试菌株和大豆品种 | 第147-148页 |
·供试药剂和培养基 | 第148页 |
·大豆疫霉的接种及菌丝基因组DNA、RNA的提取和CDNA合成 | 第148-149页 |
·Pszfl基因克隆、载体构建及序列分析 | 第149页 |
·大豆疫霉的转化 | 第149-150页 |
·致病性测定 | 第150页 |
·对H_2O_2的耐受性 | 第150页 |
·Southern杂交 | 第150页 |
·Pszfl的转录水平分析 | 第150-151页 |
2 结果与分析 | 第151-155页 |
·Pszfl基因克隆与序列分析 | 第151-152页 |
·Pszfl的转录水平分析 | 第152页 |
·Pszfl参与大豆疫霉的侵染和活性氧代谢 | 第152-155页 |
3 讨论 | 第155-157页 |
参考文献 | 第157-160页 |
第七章 大豆疫霉等渗调节基因Psbadhl的克隆与功能分析 | 第160-173页 |
1 材料与方法 | 第161-164页 |
·供试菌株和大豆品种 | 第161页 |
·供试药剂和培养基 | 第161-162页 |
·大豆疫霉的接种及菌丝基因组DNA、RNA的提取和CDNA合成 | 第162页 |
·Psbadhl基因克隆、载体构建及序列分析 | 第162页 |
·大豆疫霉的转化 | 第162-163页 |
·致病性测定 | 第163页 |
·大豆疫霉菌株对NaCl的耐受性 | 第163页 |
·大豆疫霉PsBADHl酶活性测定 | 第163页 |
·Southern杂交 | 第163-164页 |
·Psbadhl的转录水平分析 | 第164页 |
2 结果与分析 | 第164-170页 |
·Psbadhl基因克隆 | 第164-165页 |
·Psbadhl基因序列分析 | 第165页 |
·Psbadhl的转录水平分析 | 第165页 |
·Psbadhl参与应对盐胁迫 | 第165-167页 |
·PSBADHl具有BADH酶活性 | 第167-170页 |
3 讨论 | 第170-171页 |
参考文献 | 第171-173页 |
附录 | 第173-180页 |
攻读博士学位期问发表的研究论文 | 第180-182页 |
致谢 | 第182页 |