| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-22页 |
| ·白斑综合症病毒的化学组成和理化特性 | 第8-9页 |
| ·白斑综合症病毒的致病机理 | 第9-10页 |
| ·白斑综合症病毒的宿主和传播途径 | 第10-12页 |
| ·白斑综合症病毒的宿主 | 第10-11页 |
| ·白斑综合症病毒的传播途径 | 第11-12页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分子生物学研究进展 | 第12-17页 |
| ·WSSV 的基因组 | 第12-14页 |
| ·病毒蛋白 | 第14-16页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分子检测 | 第16-17页 |
| ·存在的问题及展望 | 第17页 |
| ·原核表达体系的研究与应用 | 第17-19页 |
| ·概述 | 第17-18页 |
| ·PET 表达系统 | 第18-19页 |
| ·研究的目的、意义 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·技术路线 | 第20-22页 |
| ·路线1 | 第20-21页 |
| ·路线2 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·实验对虾 | 第22页 |
| ·菌种与质粒 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-30页 |
| ·PCR 模板DNA 制备方法 | 第22-23页 |
| ·引物的筛选 | 第23页 |
| ·PCR 反应体系的优化及建立 | 第23页 |
| ·WSSV PCR 检测体系灵敏度试验 | 第23页 |
| ·WSSV PCR 检测体系特异性 | 第23页 |
| ·PCR 产物的电泳检测 | 第23页 |
| ·PCR 检测体系产物的克隆测序 | 第23-26页 |
| ·样品检测试验 | 第26页 |
| ·VP28 基因的引物设计 | 第26页 |
| ·VP28 基因的克隆及序列分析 | 第26-27页 |
| ·pTEVP酶切及VP28基因的回收 | 第27页 |
| ·pET 载体酶切及大片段回收 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·重组质粒DNA 的大量制备及纯化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒转化宿主菌 | 第29页 |
| ·WSSV VP28 基因的表达 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第29-30页 |
| ·考马斯亮蓝染色和脱色 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-42页 |
| ·两种不同制备WSSV 模板DNA 方法的比较 | 第30-31页 |
| ·引物的筛选 | 第31页 |
| ·PCR 反应体系建立 | 第31-34页 |
| ·引物浓度 | 第31-32页 |
| ·Mg~(2+)浓度 | 第32页 |
| ·dNTPs 浓度 | 第32页 |
| ·退火温度 | 第32-33页 |
| ·Taq 酶的浓度 | 第33-34页 |
| ·WSSV PCR 检测体系灵敏度试验 | 第34页 |
| ·WSSV PCR 检测体系特异性试验 | 第34-35页 |
| ·PCR 扩增产物测序 | 第35页 |
| ·临床检测试验 | 第35-36页 |
| ·WSSV VP28 基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·VP28 基因序列的分析 | 第37-39页 |
| ·重组载体pET-30a-VP28 的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组表达载体pET-30a-VP28 的序列分析 | 第40-41页 |
| ·VP28 基因的表达分析 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·PCR 检测体系建立的影响因素 | 第42-43页 |
| ·WSSV VP28 基因的稳定性 | 第43页 |
| ·外源基因表达的影响因素 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩写词 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 中文详细摘要 | 第56-59页 |