| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要（abstract） | 第4-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·蛋白酶概述 | 第9-10页 |
| ·蛋白酶分布 | 第9页 |
| ·蛋白酶分类 | 第9-10页 |
| ·碱性蛋白酶 | 第10页 |
| ·碱性蛋白酶的性质 | 第10-12页 |
| ·最佳pH 及温度 | 第10页 |
| ·分子量及等电点 | 第10-11页 |
| ·激活剂与抑制剂 | 第11页 |
| ·碱性蛋白酶的专一性 | 第11-12页 |
| ·碱性蛋白酶的作用机制 | 第12页 |
| ·碱性蛋白酶活性测定方法 | 第12-13页 |
| ·福林(Folin)法 | 第12-13页 |
| ·紫外分光光度法 | 第13页 |
| ·甲醛滴定法 | 第13页 |
| ·重氮5-氨基四哇酪蛋白法(DHT-Casein ) | 第13页 |
| ·食线虫真菌蛋白酶的研究现状 | 第13-16页 |
| ·蛋白酶在侵入过程中的作用 | 第13-14页 |
| ·丝氨酸蛋白酶类 | 第14-16页 |
| ·胶原蛋白酶 | 第16页 |
| ·食线虫真菌相关蛋白酶基因克隆 | 第16-17页 |
| ·食线虫真菌――淡紫拟青霉 | 第17-20页 |
| ·线虫的危害 | 第17-18页 |
| ·食线虫真菌在线虫防治中的重要作用 | 第18-19页 |
| ·食线虫淡紫拟青霉 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究意义和主要内容 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第22-24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·酶活的测定 | 第24-25页 |
| ·蛋白酶产酶条件研究 | 第25-26页 |
| ·酶性质研究 | 第26-27页 |
| ·拟青霉E7 蛋白酶PL 基因克隆 | 第27-32页 |
| ·PL 基因的表达 | 第32-34页 |
| ·pET-PL 转化BL21(DE3) | 第34-36页 |
| ·抗血清的制备与效价测定 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-51页 |
| ·酶活力测定标准曲线 | 第38页 |
| ·产酶条件的研究 | 第38-42页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第39-40页 |
| ·最佳碳氮配比 | 第40-41页 |
| ·装液量对产酶的影响 | 第41页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·发酵初始pH 对产酶的影响 | 第42页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第42页 |
| ·酶学性质 | 第42-45页 |
| ·酶反应最适温度 | 第42-43页 |
| ·酶作用最适pH | 第43-44页 |
| ·蛋白酶的热稳定性 | 第44页 |
| ·蛋白酶的pH 稳定性 | 第44-45页 |
| ·蛋白酶PL 基因克隆及表达 | 第45-47页 |
| ·E7 菌株RNA 的提取 | 第45页 |
| ·利用RT-PCR 技术获取PL cDNA | 第45-46页 |
| ·PL cDNA 基因的克隆及鉴定 | 第46页 |
| ·PL 基因片段序列的同源性分析 | 第46-47页 |
| ·蛋白酶结构预测 | 第47页 |
| ·PL 基因在大肠杆菌中的表达 | 第47-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·表达分析 | 第48-49页 |
| ·抗血清制备及效价测定 | 第49-51页 |
| ·抗血清制备 | 第49-50页 |
| ·抗血清效价测定 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-53页 |
| ·产酶条件 | 第51页 |
| ·PL 基因表达 | 第51-53页 |
| 5. 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 摘要 | 第62-64页 |
| Abstract | 第64-65页 |