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猪卵丘细胞核移植研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
文献综述第10-22页
 1.动物细胞核移植技术研究的历史与现状第11-12页
 2.动物细胞核移植的操作程序第12-18页
     ·MⅡ期卵母细胞的去核第12-14页
       ·盲吸去核法第12页
       ·活性荧光染料染色去核法第12-13页
       ·半卵去核法第13页
       ·微分干涉和极性显微镜去核法第13页
       ·功能性去核法第13页
       ·化学试剂去核法第13页
       ·末期去核法第13页
       ·蔗糖去核法第13-14页
     ·供核细胞的准备第14-18页
       ·关于供核细胞的种类问题第14页
       ·关于供核细胞的来源问题第14页
       ·关于供核细胞细胞周期与受体卵母细胞胞质状态的协调问题第14-15页
       ·核移植胚胎的重构(供核细胞的移植)第15页
       ·供核细胞与受体卵母细胞的融合第15-16页
       ·重建胚的激活第16-18页
       ·核移植重建胚的培养第18页
 3.影响核移植效率的因素第18-20页
     ·受体卵母细胞质第18-19页
     ·供核细胞的来源和所处的细胞周期第19页
     ·受体卵母细胞的去核第19-20页
 4.体细胞核移植技术的应用前景第20页
     ·扩大优良种畜或稀有动物的数量第20页
     ·生产转基因动物第20页
     ·生产胚胎干细胞用于细胞和组织的代替疗法第20页
     ·肿瘤和癌细胞基因活动规律的研究第20页
 5.细胞核移植技术存在的问题第20-21页
     ·核移植的总效率很低第20页
     ·后代存活率低第20-21页
     ·线粒体DNA(mDNA)问题第21页
 6.本实验研究的目的和意义第21-22页
实验部分第22-41页
 第一部分:材料与用具第23-27页
  1.主要仪器、器具及主要试剂第23-25页
     ·主要仪器、器具第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要器具的制备第24-25页
       ·固定管的制备第24-25页
       ·去核针的制备第25页
       ·注核针的制备第25页
  2.本试验涉及的培养液第25-27页
     ·猪胚胎体外培养液NCSU-23第25页
     ·猪卵母细胞体外成熟基础培养基(改良TCM199)第25-26页
     ·洗卵液及抽卵液第26页
       ·洗卵液第26页
       ·抽卵液第26页
       ·融合液第26页
       ·显微操作液第26页
     ·发情牛(猪)血清的制备第26-27页
     ·猪卵泡液的制备第27页
 第二部分:实验方法与实验设计第27-30页
  1.试验方法第27-29页
     ·猪卵母细胞的收集及体外成熟(IVM)第27页
     ·猪卵丘细胞的分离与培养第27-28页
     ·去核、移核操作第28页
       ·盲吸法第28页
       ·活性荧光染色去核法第28页
       ·盲吸法和活性荧光染色法联合去核法第28页
     ·供核体细胞与受体卵母细胞的融合第28-29页
     ·核移植后的重建胚激活第29页
     ·核移胚的培养和体外发育第29页
  2. 实验设计第29-30页
   ·不同级别猪卵母细胞对体外成熟的影晌第29页
     ·不同培养基添加物对猪卵母细胞体外成熟影晌第29页
     ·培养的卯丘细胞和直接分离的卵丘细胞对猪体细胞核移植的影响第29页
     ·不同去核方法对猪卵母细胞的去核效果第29页
     ·不同移核方式对猪体细胞核移植效果的影响第29-30页
     ·核质作用时间对猪体细胞核移植效果的影响第30页
 第三部分:实验结果和分析第30-34页
     ·不同级别猪卵母细胞对体外成熟的影响第30页
     ·不同培养基添加物对猪卵母细胞体外成熟影响第30-31页
     ·培养传代的卵丘细胞和直接分离的卵丘细胞对猪体细胞核移植的影响第31页
     ·不同去核方法对猪卵母细胞的去核效果第31-32页
     ·不同移核方式对猪体细胞核移植效果的影响第32页
     ·核质作用时间对猪体细胞核移植效果的影响第32-34页
 第四部分:讨论第34-40页
     ·不同级别猪卵母细胞体外成熟效果第34页
     ·不同培养基添加物对猪卵母细胞体外成熟的影响第34-35页
     ·培养的卵丘细胞和直接分离的卵丘细胞对猪体细胞核移植的影响第35-36页
     ·不同去核方法对猪卵母细胞去核效果的影响第36-38页
     ·不同移核方式对猪体细胞核移植效果的影响第38页
     ·核质作用时间对猪体细胞核移植效果的影响第38-40页
 第五部分:结论第40-41页
参考文献第41-49页
附录第49-54页
致谢第54-55页
发表文章第55页

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