| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·大豆种传检疫性病毒介绍 | 第10-13页 |
| ·菜豆荚斑驳病毒 | 第10页 |
| ·烟草环斑病毒 | 第10-11页 |
| ·番茄环斑病毒 | 第11-12页 |
| ·南芥菜花叶病毒 | 第12页 |
| ·南方菜豆花叶病毒 | 第12页 |
| ·花生矮化病毒 | 第12-13页 |
| ·植物病毒的主要检测方法 | 第13-20页 |
| ·指示植物接种方法 | 第13页 |
| ·血清学检测 | 第13-14页 |
| ·电子显微镜技术 | 第14-15页 |
| ·分子生物学技术 | 第15-18页 |
| ·生物芯片技术 | 第18-20页 |
| ·国内外同类研究现状分析及存在的问题 | 第20页 |
| ·展望 | 第20-22页 |
| 第二章BPMV、TRSV、ToRSV 及大豆内源基因BD30K 质粒的制备及其多重检测技术的研究 | 第22-34页 |
| ·材料与设备 | 第22-23页 |
| ·大豆种子材料 | 第22页 |
| ·试验所用的仪器及试剂 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·大豆总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·PCR 扩增及产物鉴定 | 第24-25页 |
| ·DNA 克隆 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的提取和鉴定 | 第26-27页 |
| ·以4 种质粒为模板的PCR 检测 | 第27-28页 |
| ·内源基因的选择 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·带毒大豆种子的获得 | 第28页 |
| ·内源基因选择结果 | 第28-29页 |
| ·四种质粒的单一PCR 检测结果 | 第29-31页 |
| ·多重PCR 优化反应 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 多重RT-PCR 检测侵染大豆几种检疫性病毒及大豆内源基因的研究 | 第34-44页 |
| ·实验材料与仪器、试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·病毒接种 | 第34页 |
| ·双抗体夹心-酶联免疫吸附法(DAS-ELISA) | 第34-35页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第35页 |
| ·单一RT-PCR 反应 | 第35-36页 |
| ·多重RT-PCR 反应 | 第36-37页 |
| ·灵敏度试验 | 第37页 |
| 1）DAS-ELISA 方法的灵敏度试验 | 第37页 |
| 2）RT-PCR 的灵敏度试验 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·DAS-ELISA 检测 | 第37页 |
| ·单一RT-PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·多重RT-PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·单项RT-PCR 与多重RT-PCR 敏感性试验 | 第39-42页 |
| ·DAS-ELISA 方法的灵敏度检测 | 第42页 |
| ·RT-PCR 的灵敏度检测 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 单管实时荧光 RT-PCR 方法同时检测大豆种子中的菜豆荚斑驳病毒和烟草环斑病毒 | 第44-54页 |
| ·材料与设备 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·引物和探针的设计及合成 | 第44-45页 |
| ·BPMV 和TRSV 的单一实时荧光RT-PCR 检测 | 第45页 |
| ·BPMV 和TRSV 引物和探针的特异性实验 | 第45页 |
| ·BPMV 和TRSV 两种病毒的单管双重实时荧光RT-PCR 检测 | 第45页 |
| ·双重实时荧光PCR 特异性测试 | 第45页 |
| ·灵敏度对比实验 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-52页 |
| ·BPMV 和TRSV 引物及探针的特异性测试 | 第46-48页 |
| ·实时荧光PCR 灵敏度检测 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第54页 |
| ·展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 附录 | 第58-63页 |
| 附录A：常用缩略语表 | 第58-59页 |
| 附录B：常用生化试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第59-60页 |
| 附录C：主要试剂的配制 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
