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小鼠精子核内转染技术的建立及其机理的研究

缩略词表第1-4页
中文摘要第4-7页
ABSTRACT第7-15页
前言第15-20页
第一章 小鼠精子电转缓冲液的研究第20-34页
   ·摘要第20页
   ·引言第20-21页
   ·材料与方法第21-24页
     ·动物第21页
     ·主要试剂第21页
     ·仪器第21-22页
     ·方法与步骤第22-24页
   ·结果第24-29页
     ·精子在D-PBS+AA(对照组)中的形态第24-26页
     ·精子在实验组(低钠、高钾、等渗)电转缓冲液中的形态第26-27页
     ·不同Na~+、K~+和葡萄糖的配比情况的观察第27-28页
     ·镁离子浓度对精子样品的影响第28-29页
     ·果糖、甘露醇、蔗糖替换葡萄糖维持渗透压对精子的影响第29页
     ·引入1%浓度的甘油后对精子的影响第29页
     ·最终确定适合于精子的电转缓冲液第29页
   ·讨论第29-32页
   ·参考文献第32-34页
第二章 小鼠精子电穿孔条件的研究第34-52页
   ·摘要第34页
   ·引言第34-35页
   ·材料与方法第35-39页
     ·动物第35页
     ·主要试剂第35-37页
     ·仪器第37页
     ·方法与步骤第37-39页
   ·结果第39-47页
     ·优化第一个脉冲电压第39-40页
     ·优化第一个脉冲脉宽第40-41页
     ·碘化丙啶标准的制作第41页
     ·用碘化丙啶电穿孔半定量分析,优化头两个脉冲的电压和脉宽组合第41-44页
     ·用碘化丙啶电穿孔半定量分析,优化头两个脉冲的间隔第44-45页
     ·优化促进物质转运的低压组的脉宽第45页
     ·用荧光素标记的寡核苷酸探针BLOCK-iT~(TM) Fluorescent Oligo为大分子模型检测最终电穿孔方案的效果第45-46页
     ·最终电穿孔方案第46-47页
   ·讨论第47-49页
   ·参考文献第49-52页
第三章 小鼠阳离子多聚物PEI结合电穿孔实现小鼠精子的核内转染的研究第52-63页
   ·摘要第52页
   ·引言第52-53页
   ·材料与方法第53-57页
     ·动物第53页
     ·主要试剂第53-54页
     ·仪器第54-55页
     ·方法与步骤第55-57页
   ·结果第57-59页
     ·JetPEI-FluoF精子毒性的观察第57页
     ·JetPEI-FluoF转染后样品的观察分析第57-58页
     ·JetPEI-FluoF/DNA复合物的电穿孔后样品的观察分析第58-59页
   ·讨论第59-60页
   ·参考文献第60-63页
全文小结第63-65页
附录一:综述第65-75页
攻读学位期间成果第75-76页
致谢第76-77页
原创性声明及版权使用授权说明第77页

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