| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩写 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-42页 |
| 第一章 植物下胚轴向光弯曲机制研究进展 | 第14-28页 |
| 1 向光素受体的结构和功能 | 第14-20页 |
| ·向光素受体的发现 | 第14页 |
| ·拟南芥向光素受体的结构及特点 | 第14-17页 |
| ·拟南芥向光素受体的定位及迁移 | 第17-18页 |
| ·拟南芥向光素受体的生理功能 | 第18-20页 |
| 2 植物向光弯曲信号转导 | 第20-28页 |
| ·生长素 | 第20-23页 |
| ·NPH310 | 第23-24页 |
| ·RPT211 | 第24页 |
| ·PKS 家族 | 第24-25页 |
| ·PP2A | 第25页 |
| ·EHB112 | 第25-26页 |
| ·参与向光素介导的向光反应的其他调控成份 | 第26-28页 |
| 第二章 Ca~(2+)与植物的蓝光反应 | 第28-40页 |
| 1 Ca~(2+)信号转导 | 第28-31页 |
| 2 Ca~(2 +)信号参与蓝光反应 | 第31-35页 |
| ·Ca~(2+)信号参与气孔开放 | 第32-33页 |
| ·Ca~(2+)信号参与叶绿体运动 | 第33-34页 |
| ·Ca~(2+)信号参与向光反应 | 第34-35页 |
| 3 Ca2+信号与生长素 | 第35-37页 |
| 4 细胞内游离 Ca~(2+)浓度的检测 | 第37-40页 |
| 第三章 研究目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二部分 研究报告 | 第42-100页 |
| 第四章 PHOT1 和 PHOT2 超表达及转水母发光蛋白株系的构建 | 第42-58页 |
| 一、引言 | 第42页 |
| 二、材料和方法 | 第42-50页 |
| 1 试验材料 | 第42-45页 |
| ·植物材料 | 第42-43页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第43页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第43页 |
| ·常用培养基 | 第43-44页 |
| ·常用抗生素 | 第44页 |
| ·PCR 试验引物 | 第44-45页 |
| 2 试验方法 | 第45-50页 |
| ·材料的种植 | 第45页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 小量提取方法 | 第45页 |
| ·拟南芥总 RNA 提取方法 | 第45页 |
| ·反转录制备拟南芥 cDNA | 第45-46页 |
| ·PCR 反应 | 第46页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第46-47页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第47页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第47页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态的制备与转化 | 第47-48页 |
| ·农杆菌 GV3101 感受态的制备与转化 | 第48页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第49-50页 |
| ·拟南芥的遗传杂交 | 第50页 |
| 三、结果分析 | 第50-55页 |
| 1 提取 RNA 质量的检测 | 第50-51页 |
| 2 PHOT1 和 PHOT2 超表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3 PHOT1 和 PHOT2 超表达转基因植株的初步鉴定 | 第52-53页 |
| 4 PHOT1 和 PHOT2 超表达转基因植株表达量的鉴定 | 第53-54页 |
| 5 向光素相关突变体转水母发光蛋白植株的构建与获得 | 第54-55页 |
| 四、讨论 | 第55-58页 |
| 第五章 蓝光诱导下胚轴中胞质 Ca~(2+)浓度变化及来源分析 | 第58-72页 |
| 一、引言 | 第58页 |
| 二、材料和方法 | 第58-61页 |
| 1 试验材料 | 第58-59页 |
| ·植物材料 | 第58-59页 |
| ·实验试剂 | 第59页 |
| 2 试验方法 | 第59-61页 |
| ·拟南芥下胚轴的获得 | 第59页 |
| ·Ca~(2+)浓度的测量 | 第59-60页 |
| ·钙抑制剂的处理 | 第60页 |
| ·拟南芥下胚轴膜片钳实验 | 第60-61页 |
| 三、结果分析 | 第61-70页 |
| 1 不同蓝光光强诱导野生型下胚轴胞质 Ca~(2+)的变化 | 第61-62页 |
| 2 强蓝光诱导向光素突变体下胚轴胞质 Ca~(2 +)的变化 | 第62-64页 |
| 3 强蓝光诱导胞质 Ca~(2+)来源分析 | 第64-70页 |
| ·LaCl3对蓝光诱导的胞质 Ca~(2+)变化的影响 | 第64-65页 |
| ·EGTA 对蓝光诱导的胞质 Ca2+变化的影响 | 第65-66页 |
| ·U-73122 对蓝光诱导的胞质 Ca~(2+)变化的影响 | 第66-67页 |
| ·RR 对蓝光诱导的胞质 Ca~(2+)变化的影响 | 第67页 |
| ·蓝光对下胚轴原生质体质膜 Ca~(2+)通道活性影响 | 第67-70页 |
| 四、讨论 | 第70-72页 |
| 第六章 强蓝光诱导向光素突变体下胚轴弯曲度的变化 | 第72-80页 |
| 一、引言 | 第72页 |
| 二、实验材料和方法 | 第72-73页 |
| 1 实验材料 | 第72-73页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·试验试剂 | 第72-73页 |
| 2 下胚轴弯曲表型实验 | 第73页 |
| 三、结果分析 | 第73-78页 |
| 1 不同蓝光光强对向光素突变体下胚轴弯曲度的影响 | 第73-74页 |
| 2 强蓝光诱导向光素突变体下胚轴弯曲度的 Time Course 变化 | 第74-76页 |
| 3 强蓝光诱导向光素突变体下胚轴弯曲度的变化 | 第76-77页 |
| 4 钙抑制剂对强蓝光诱导向光素突变体下胚轴弯曲的影响 | 第77-78页 |
| 四、讨论 | 第78-80页 |
| 第七章 强蓝光诱导下 PHOT2 介导的向光弯曲机制探讨 | 第80-98页 |
| 一、引言 | 第80页 |
| 二、材料和方法 | 第80-87页 |
| 1 实验材料 | 第80-82页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·质粒及菌株 | 第80页 |
| ·分子生化试验试剂及试剂盒 | 第80-81页 |
| ·试验引物 | 第81-82页 |
| 2 试验方法 | 第82-87页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第82页 |
| ·Real-time PCR 实验 | 第82-83页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第83-86页 |
| ·PEG 介导的瞬时转化和 BiFC 荧光分析 | 第86-87页 |
| ·T-DNA 插入缺失纯合突变体的鉴定 | 第87页 |
| ·叶绿体避光运动实验 | 第87页 |
| 三、结果分析 | 第87-96页 |
| 1 强蓝光诱导 PHOT2 的表达量分析 | 第87-89页 |
| 2 PHOT1 和 PHOT2 之间不互作 | 第89-90页 |
| 3 强蓝光诱导向光素突变体中 PKS1 的表达分析 | 第90-91页 |
| 4 PKS1 和 PHOT1/PHOT2 互作 | 第91-92页 |
| 5 PKS1 和 CAM4/CAM5 互作 | 第92-93页 |
| 6 遗传分析初步试验 | 第93-96页 |
| ·pks T-DNA 插入突变体纯合体的鉴定 | 第93-95页 |
| ·phot1pks/phot2pks 突变体的构建 | 第95-96页 |
| 四、讨论 | 第96-98页 |
| 第八章 结论 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
