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多肽的合成、分离纯化及巯基氧化反应研究

第一章 文献综述第1-20页
 1.1 多肽合成研究的意义第10页
 1.2 多肽的基础知识第10-12页
  1.2.1 多肽的概念第10页
  1.2.2 多肽的物理和化学性质第10-11页
  1.2.3 多肽的分类第11-12页
 1.3 多肽合成的发展史第12页
 1.4 固相合成多肽的原理及发展应用第12-13页
 1.5 Fmoc固相合成中的耦联方法第13-15页
 1.6 色谱在多肽与蛋白质分离纯化方面的应用第15-16页
 1.7 促进二硫键形成的方法第16-18页
 1.8 多肽的应用与研究方向第18-20页
第二章 多肽的合成第20-37页
 2.1 前言第20-22页
 2.2 实验部分第22-29页
  2.2.1 仪器和设备第22页
  2.2.2 试剂第22-23页
  2.2.3 实验装置图第23-25页
   2.2.3.1 多肽合成实验装置图第23-24页
   2.2.3.2 多肽切割实验装置图第24-25页
  2.2.4 奥曲肽的合成第25-26页
   2.2.4.1 树脂的溶胀第25页
   2.2.4.2 树脂的洗涤第25页
   2.2.4.3 Fmoc基团的脱除第25页
   2.2.4.4 茚三酮检测第25-26页
   2.2.4.5 氨基酸的缩合反应第26页
   2.2.4.6 肽-树脂的切割第26页
  2.2.5 Phe-Leu-Glu-Glu-Leu的合成第26-27页
   2.2.5.1 树脂的溶胀第26-27页
   2.2.5.2 树脂上第一个氨基酸的接肽反应第27页
   2.2.5.3 Fmoc基团的脱除、氨基酸的缩合反应、肽-树脂的切割第27页
  2.2.6 C_(15)H_(31)-CO-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser的合成第27-28页
   2.2.6.1 树脂的溶胀第27页
   2.2.6.2 树脂上第一个氨基酸的接肽反应第27页
   2.2.6.3 Fmoc基团的脱除、氨基酸的缩合反应第27页
   2.2.6.4 Fmoc-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser中α-NH_2基的酰化反应第27-28页
   2.2.6.5 树脂的切割第28页
  2.2.7 放大规模的奥曲肽合成第28-29页
   2.2.7.1 树脂的溶胀第28页
   2.2.7.2 树脂的洗涤第28页
   2.2.7.3 Fmoc基团的脱除第28页
   2.2.7.4 氨基酸的缩合反应第28页
   2.2.7.5 肽-树脂的切割第28-29页
 2.3 结果与讨论第29-36页
  2.3.1 多肽合成中树脂的选择第29页
  2.3.2 多肽合成中保护基的选择第29-30页
  2.3.3 缩合反应试剂的选择第30-31页
  2.3.4 多肽合成中裂解液的选择第31-33页
  2.3.5 放大规模合成时缩合剂浓度的选择第33-34页
  2.3.6 多肽粗产品的产率第34页
  2.3.7 多肽合成结果的定性表征第34-36页
 2.4 小结第36-37页
第三章 多肽的分离与纯化第37-48页
 3.1 前言第37页
 3.2 实验部分第37-40页
  3.2.1 仪器和设备第37-38页
  3.2.2 试剂及药品第38页
  3.2.3 流动相组成第38页
  3.2.4 高压液相色谱柱的装填第38-39页
  3.2.5 还原变性奥曲肽的制备第39页
  3.2.6 还原变性奥曲肽的分离纯化步骤第39页
  3.2.7 巯基含量的测定第39-40页
  3.2.8 奥曲肽标准曲线的绘制及应用第40页
 3.3 结果与讨论第40-47页
  3.3.1 奥曲肽分离纯化后产品的检测第40-42页
   3.3.1.1 奥曲肽纯度的检测第40-41页
   3.3.1.2 标准曲线法确定奥曲肽的含量第41-42页
   3.3.1.3 MALDI-TOF mass检测第42页
  3.3.2 C_(15)H_(31)-CO-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser分离条件的选择及其纯化后结果第42-44页
  3.3.3 Phe-Leu-Glu-Glu-Leu分离条件的选择及其纯化后结果第44-47页
 3.4 小结第47-48页
第四章 氧化还原型奥曲肽的几种方法的比较第48-58页
 4.1 前言第48页
 4.2 实验部分第48-50页
  4.2.1 仪器和设备第48-49页
  4.2.2 试剂及药品第49页
  4.2.3 巯基含量的测定第49页
  4.2.4 空气氧化法第49页
  4.2.5 H_2O_2氧化法第49-50页
  4.2.6 DMSO氧化法第50页
  4.2.7 CuSO_4氧化法第50页
  4.2.8 K_3Fe(CN)_6氧化法第50页
  4.2.9 色谱条件第50页
 4.3 结果与讨论第50-56页
  4.3.1 还原型奥曲肽在0.05mg/mL浓度下各种氧化方法结果的比较第50-51页
  4.3.2 空气氧化法中多肽浓度对氧化效率的影响第51-52页
  4.3.3 H_ZO_2氧化法中双氧水的浓度对氧化结果的影响第52-53页
  4.3.4 K_3Fe(CN)_6氧化法的动力学第53-54页
  4.3.5 Cu~(2+)氧化法的动力学第54页
  4.3.6 DMSO氧化法的动力学第54-55页
  4.3.7 各种氧化结果的色谱检测第55-56页
 4.4 小结第56-58页
参考文献第58-62页
致谢第62页

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