第一章 文献综述 | 第1-20页 |
1.1 多肽合成研究的意义 | 第10页 |
1.2 多肽的基础知识 | 第10-12页 |
1.2.1 多肽的概念 | 第10页 |
1.2.2 多肽的物理和化学性质 | 第10-11页 |
1.2.3 多肽的分类 | 第11-12页 |
1.3 多肽合成的发展史 | 第12页 |
1.4 固相合成多肽的原理及发展应用 | 第12-13页 |
1.5 Fmoc固相合成中的耦联方法 | 第13-15页 |
1.6 色谱在多肽与蛋白质分离纯化方面的应用 | 第15-16页 |
1.7 促进二硫键形成的方法 | 第16-18页 |
1.8 多肽的应用与研究方向 | 第18-20页 |
第二章 多肽的合成 | 第20-37页 |
2.1 前言 | 第20-22页 |
2.2 实验部分 | 第22-29页 |
2.2.1 仪器和设备 | 第22页 |
2.2.2 试剂 | 第22-23页 |
2.2.3 实验装置图 | 第23-25页 |
2.2.3.1 多肽合成实验装置图 | 第23-24页 |
2.2.3.2 多肽切割实验装置图 | 第24-25页 |
2.2.4 奥曲肽的合成 | 第25-26页 |
2.2.4.1 树脂的溶胀 | 第25页 |
2.2.4.2 树脂的洗涤 | 第25页 |
2.2.4.3 Fmoc基团的脱除 | 第25页 |
2.2.4.4 茚三酮检测 | 第25-26页 |
2.2.4.5 氨基酸的缩合反应 | 第26页 |
2.2.4.6 肽-树脂的切割 | 第26页 |
2.2.5 Phe-Leu-Glu-Glu-Leu的合成 | 第26-27页 |
2.2.5.1 树脂的溶胀 | 第26-27页 |
2.2.5.2 树脂上第一个氨基酸的接肽反应 | 第27页 |
2.2.5.3 Fmoc基团的脱除、氨基酸的缩合反应、肽-树脂的切割 | 第27页 |
2.2.6 C_(15)H_(31)-CO-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser的合成 | 第27-28页 |
2.2.6.1 树脂的溶胀 | 第27页 |
2.2.6.2 树脂上第一个氨基酸的接肽反应 | 第27页 |
2.2.6.3 Fmoc基团的脱除、氨基酸的缩合反应 | 第27页 |
2.2.6.4 Fmoc-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser中α-NH_2基的酰化反应 | 第27-28页 |
2.2.6.5 树脂的切割 | 第28页 |
2.2.7 放大规模的奥曲肽合成 | 第28-29页 |
2.2.7.1 树脂的溶胀 | 第28页 |
2.2.7.2 树脂的洗涤 | 第28页 |
2.2.7.3 Fmoc基团的脱除 | 第28页 |
2.2.7.4 氨基酸的缩合反应 | 第28页 |
2.2.7.5 肽-树脂的切割 | 第28-29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-36页 |
2.3.1 多肽合成中树脂的选择 | 第29页 |
2.3.2 多肽合成中保护基的选择 | 第29-30页 |
2.3.3 缩合反应试剂的选择 | 第30-31页 |
2.3.4 多肽合成中裂解液的选择 | 第31-33页 |
2.3.5 放大规模合成时缩合剂浓度的选择 | 第33-34页 |
2.3.6 多肽粗产品的产率 | 第34页 |
2.3.7 多肽合成结果的定性表征 | 第34-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
第三章 多肽的分离与纯化 | 第37-48页 |
3.1 前言 | 第37页 |
3.2 实验部分 | 第37-40页 |
3.2.1 仪器和设备 | 第37-38页 |
3.2.2 试剂及药品 | 第38页 |
3.2.3 流动相组成 | 第38页 |
3.2.4 高压液相色谱柱的装填 | 第38-39页 |
3.2.5 还原变性奥曲肽的制备 | 第39页 |
3.2.6 还原变性奥曲肽的分离纯化步骤 | 第39页 |
3.2.7 巯基含量的测定 | 第39-40页 |
3.2.8 奥曲肽标准曲线的绘制及应用 | 第40页 |
3.3 结果与讨论 | 第40-47页 |
3.3.1 奥曲肽分离纯化后产品的检测 | 第40-42页 |
3.3.1.1 奥曲肽纯度的检测 | 第40-41页 |
3.3.1.2 标准曲线法确定奥曲肽的含量 | 第41-42页 |
3.3.1.3 MALDI-TOF mass检测 | 第42页 |
3.3.2 C_(15)H_(31)-CO-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser分离条件的选择及其纯化后结果 | 第42-44页 |
3.3.3 Phe-Leu-Glu-Glu-Leu分离条件的选择及其纯化后结果 | 第44-47页 |
3.4 小结 | 第47-48页 |
第四章 氧化还原型奥曲肽的几种方法的比较 | 第48-58页 |
4.1 前言 | 第48页 |
4.2 实验部分 | 第48-50页 |
4.2.1 仪器和设备 | 第48-49页 |
4.2.2 试剂及药品 | 第49页 |
4.2.3 巯基含量的测定 | 第49页 |
4.2.4 空气氧化法 | 第49页 |
4.2.5 H_2O_2氧化法 | 第49-50页 |
4.2.6 DMSO氧化法 | 第50页 |
4.2.7 CuSO_4氧化法 | 第50页 |
4.2.8 K_3Fe(CN)_6氧化法 | 第50页 |
4.2.9 色谱条件 | 第50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-56页 |
4.3.1 还原型奥曲肽在0.05mg/mL浓度下各种氧化方法结果的比较 | 第50-51页 |
4.3.2 空气氧化法中多肽浓度对氧化效率的影响 | 第51-52页 |
4.3.3 H_ZO_2氧化法中双氧水的浓度对氧化结果的影响 | 第52-53页 |
4.3.4 K_3Fe(CN)_6氧化法的动力学 | 第53-54页 |
4.3.5 Cu~(2+)氧化法的动力学 | 第54页 |
4.3.6 DMSO氧化法的动力学 | 第54-55页 |
4.3.7 各种氧化结果的色谱检测 | 第55-56页 |
4.4 小结 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
致谢 | 第62页 |